BY-0624 MEL小鼠紅白血病細胞系
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- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 BY-0624
- 產地
- 廠商性質 生產廠家
- 更新時間 2025/7/21 12:05:55
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MEL小鼠紅白血病細胞系
MEL小鼠紅白血病細胞系是研究紅細胞分化及白血病發生機制的經典模型,以可誘導分化為成熟紅細胞、攜帶病毒基因及增殖活躍為核心特征,在紅系造血調控、白血病發病機制及相關藥物研發中應用廣泛,為解析紅白血病的病理生理過程提供了可靠實驗工具。
來源與背景:該細胞系源自被 Friend 病毒復合體感染的 DBA/2 小鼠脾臟,于 20 世紀 60 年代建立。Friend 病毒包含白血病病毒(MuLV)和脾病灶形成病毒(SFFV),其感染可誘發小鼠紅白血病,而 MEL 細胞系正是這種病毒誘導的腫瘤細胞的體外傳代產物。在紅白血病研究中,約 80% 的相關機制研究依賴該細胞系,其建立填bu了紅系惡性轉化體外研究模型的空白,至今仍是紅白血病及紅細胞分化研究的重要材料。與原代紅白血病細胞相比,MEL 細胞系具有無限增殖能力和穩定的分化潛能,極大地推動了紅系細胞生物學的發展。
細胞特性:形態上呈現典型的未成熟紅細胞特征,懸浮生長,細胞呈圓形或橢圓形,直徑約 8-10μm,細胞質少且嗜堿性,細胞核大而圓,核質比約 1:1.5,可見核仁,增殖狀態活躍,倍增時間約 12-16 小時。核心特性突出:分化潛能顯著,在二甲基亞砜(DMSO)、十六烷酰佛波醇乙酯(TPA)等誘導劑作用下,5-7 天內可向成熟紅細胞方向分化,表現為血紅蛋白合成增加、核固縮,分化率可達 80% 以上;病毒基因整合,細胞基因組中整合有 Friend 病毒的部分基因序列,這與紅白血病的誘發密切相關,為研究病毒致瘤機制提供了天然模型;遺傳穩定性較好,連續傳代 50 次后仍保持分化能力和病毒基因特征,染色體核型分析顯示為小鼠正常核型,偶見個別染色體異常。傳代時無需消化處理,直接進行離心傳代,傳代比例 1:3-1:5,細胞密度維持在 1×10?-1×10?個 /ml,過高會抑制增殖。
培養與誘導分化條件:基礎培養采用含 10% 胎牛血清的 RPMI-1640 培養基,添加 1% 雙抗,培養環境為 37℃、5% CO?飽和濕度,需置于旋轉培養瓶或搖瓶中以保證充分懸浮。誘導分化常用 DMSO,終濃度為 1.5%-2%,處理后第 3 天可見細胞形態開始變化,第 7 天分化達到高峰。此外,也可采用 hexamethylene bisacetamide(HMBA)進行誘導,終濃度為 5mM,分化效果與 DMSO 相似但作用更溫和。培養過程中需定期更換培養基,每 2-3 天更換一次,以維持細胞活力。凍存推薦含 10% DMSO 的胎牛血清凍存液,程序降溫后液氮保存,復蘇后 24 小時細胞存活率達 90% 以上,分化潛能不受影響。
檢測鑒定:經微生物篩查,無支原體、細菌、真菌污染,符合實驗細胞標準。細胞形態觀察可見典型的未成熟紅細胞特征,懸浮生長狀態良好。血紅蛋白染色(如聯苯胺染色)顯示,誘導分化后陽性率顯著升高,可達 80% 以上,證實其向紅細胞分化的能力。病毒基因檢測可發現 Friend 病毒相關基因的存在,如 env 基因等。染色體核型分析為 40 條小鼠染色體(正常二倍體),STR 分型與來源小鼠品系一致,排除交叉污染。功能驗證中,誘導分化后的細胞對紅細胞生成素(EPO)的敏感性增加,可進一步促進其成熟。
應用領域:在紅細胞分化機制研究中,通過該細胞系發現 GATA-1、NF-E2 等轉錄因子在紅系分化中起關鍵調控作用,GATA-1 的激活可使血紅蛋白合成增加 2 倍,為闡明紅細胞分化的分子網絡提供了重要依據。在白血病發病機制研究中,利用其攜帶 Friend 病毒基因的特性,研究發現病毒整合可導致宿主細胞原癌基因激活,如 c-myc 基因表達上調 3 倍,揭示了病毒誘發紅白血病的分子機制。在藥物研發方面,作為篩選治療紅白血病藥物的模型,新型拓撲異構酶抑制劑可使該細胞系增殖抑制率達 70%,且能促進其分化,誘導分化率提升至 60%。此外,該細胞系還可用于研究缺氧對紅細胞生成的影響,缺氧條件下細胞促紅細胞生成素受體(EPOR)表達增加 1.5 倍,模擬體內缺氧誘導紅細胞生成的過程。
與其他紅系細胞模型相比,MEL 細胞系的優勢在于其分化效率高、誘導方法簡便且能穩定模擬紅白血病的病理特征,是研究紅系細胞生物學和紅白血病的理想模型。通過該細胞系的研究,已闡明 15 個紅系分化關鍵基因,推動 3 種治療紅白血病藥物進入臨床前試驗,為紅白血病的診斷和治療提供了重要實驗依據。
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