CT26WT小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞系
CT26WT小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞系源自 BALB/c 小鼠的自發(fā)性結(jié)腸癌，因保留野生型遺傳背景且成瘤性穩(wěn)定，成為結(jié)直腸癌研究領(lǐng)域的經(jīng)典模型。其與人類結(jié)腸癌在病理特征、分子機(jī)制上的高度相似性，使其在腫瘤發(fā)生發(fā)展、藥物篩選及免yi治療研究中占據(jù)重要地位，為基礎(chǔ)研究向臨床轉(zhuǎn)化搭建了關(guān)鍵橋梁。
顯微鏡下觀察，CT26WT 細(xì)胞呈貼壁生長態(tài)勢，形態(tài)以多邊形和短梭形為主，宛如鋪展在培養(yǎng)皿上的 “不規(guī)則斑塊”。細(xì)胞直徑約 16-22 微米，比正常結(jié)腸上皮細(xì)胞稍大；胞質(zhì)豐富，可見少量分泌顆粒，部分細(xì)胞內(nèi)存在脂褐素樣包涵體，這是結(jié)腸癌細(xì)胞的典型胞質(zhì)特征；細(xì)胞核呈卵圓形或不規(guī)則形，核質(zhì)比約 1:1.5，染色質(zhì)濃密呈塊狀，核仁明顯且多為 1-2 個，展現(xiàn)出活躍的增殖能力。細(xì)胞倍增時間約 22-30 小時，當(dāng)融合度達(dá)到 70%-80% 時需傳代，傳代時用 EDTA 溶液處理后輕柔吹打使細(xì)胞脫落，按 1:3-1:5 比例接種，連續(xù)培養(yǎng) 60 代仍能保持穩(wěn)定的腫瘤表型和致瘤性。
培養(yǎng) CT26WT 細(xì)胞需模擬腸道微環(huán)境。基礎(chǔ)培養(yǎng)基選用 RPMI 1640，其含有的多種氨基酸和維生素可滿足細(xì)胞代謝需求；添加 10% 熱滅活胎牛血清提供生長因子，其中血清中的轉(zhuǎn)化生長因子 -β（TGF-β）前體對維持細(xì)胞的上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化特性至關(guān)重要。培養(yǎng)環(huán)境需嚴(yán)格控制在 37℃、5% CO?的恒溫培養(yǎng)箱中，pH 值穩(wěn)定在 7.2-7.4，通過培養(yǎng)基中的酚紅指示劑可直觀監(jiān)測酸堿變化。與其他結(jié)腸癌細(xì)胞系相比，該細(xì)胞對營養(yǎng)條件要求較為寬松，但需避免培養(yǎng)基中谷an酰胺降解，建議每 2-3 天更換一次培養(yǎng)基，以保持細(xì)胞活力。
在結(jié)直腸癌發(fā)病機(jī)制研究中，CT26WT 細(xì)胞系是解析基因突變與腫瘤進(jìn)展關(guān)系的理想工具。其攜帶 K-ras 基因突變 —— 這與人類結(jié)直腸癌中常見的激活突變高度一致。實(shí)驗(yàn)顯示，該細(xì)胞在體外培養(yǎng)時，Ras/MAPK 信號通路持續(xù)激活，ERK1/2 磷酸化水平較正常結(jié)腸上皮細(xì)胞高 3-4 倍，導(dǎo)致細(xì)胞增殖不受控。通過 RNA 干擾技術(shù)沉默 K-ras 基因后，細(xì)胞的克隆形成能力下降 60%，裸鼠成瘤體積縮小 70%，直接證明 K-ras 突變在結(jié)直腸癌發(fā)生中的驅(qū)動作用。此外，該細(xì)胞還存在 APC 基因功能異常，導(dǎo)致 β- 連環(huán)蛋白在胞質(zhì)和細(xì)胞核內(nèi)積累，激活下游靶基因 c-Myc、Cyclin D1 的表達(dá)，wan美模擬了人類結(jié)直腸癌中 Wnt 信號通路異常激活的典型特征。
在藥物篩選領(lǐng)域，CT26WT 細(xì)胞系是評估抗結(jié)直腸癌藥物療效的常用模型。其對 5 - 氟尿*啶（5-FU）等經(jīng)典hua療藥物的敏感性與人類結(jié)腸癌組織接近，IC50 值約為 12μM，可通過 MTT 法快速檢測藥物對細(xì)胞增殖的抑制率。在篩選新型靶向藥物時，該細(xì)胞系能有效反映藥物對特定靶點(diǎn)的作用，例如，使用抗 EGFR 單克隆抗體處理后，細(xì)胞表面 EGFR 的磷酸化水平下降 80%，細(xì)胞遷移能力降低 50%，為評估 EGFR 抑制劑的療效提供了可靠依據(jù)。同時，該細(xì)胞系可用于構(gòu)建荷瘤小鼠模型，通過測量腫瘤體積變化和計(jì)算抑瘤率，評估藥物的體內(nèi)療效，實(shí)驗(yàn)顯示，5-FU 處理可使荷瘤小鼠的腫瘤生長延遲 5-7 天，生存期延長 30% 以上。
在腫瘤免疫研究中，CT26WT 細(xì)胞系的免疫原性特征使其成為免yi治療研究的理想模型。該細(xì)胞表達(dá)多種腫瘤相關(guān)抗原，如癌胚抗原（CEA）和熱休克蛋白 70（HSP70），可被免疫系統(tǒng)識別。其荷瘤小鼠模型具有完整的免疫系統(tǒng)，能模擬人類結(jié)直腸癌的腫瘤免疫微環(huán)境，例如，腫瘤微環(huán)境中存在大量調(diào)節(jié)性 T 細(xì)胞（Treg）和 M2 型巨噬細(xì)胞，可抑制效應(yīng) T 細(xì)胞的抗腫瘤活性。在免疫檢查點(diǎn)抑制劑研究中，使用抗 PD-1 抗體處理荷瘤小鼠，可使腫瘤內(nèi) CD8?T 細(xì)胞浸潤增加 2-3 倍，腫瘤生長抑制率達(dá) 50% 以上，這與臨床中部分結(jié)直腸癌患者對 PD-1 抑制劑響應(yīng)的特征高度相似，為免yi治liao機(jī)制研究和聯(lián)合治療策略探索提供了jue佳模型。
在腫瘤轉(zhuǎn)移研究中，CT26WT 細(xì)胞系因具有穩(wěn)定的轉(zhuǎn)移潛能而被廣泛應(yīng)用。通過尾靜脈注射建立肺轉(zhuǎn)移模型，可見該細(xì)胞在肺部形成轉(zhuǎn)移性結(jié)節(jié)，轉(zhuǎn)移率達(dá) 60% 以上，轉(zhuǎn)移灶的病理特征與人類結(jié)腸癌肺轉(zhuǎn)移相似。研究發(fā)現(xiàn)，該細(xì)胞高表達(dá)基質(zhì)金屬蛋白酶 - 7（MMP-7），可降解腸黏膜基底膜的 Ⅳ 型膠原蛋白，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移，抑制 MMP-7 活性可使細(xì)胞的侵襲能力下降 45%，肺轉(zhuǎn)移結(jié)節(jié)數(shù)量減少 50%，為開發(fā)抗轉(zhuǎn)移藥物提供了潛在靶點(diǎn)。
前沿研究中，CT26WT 細(xì)胞系的應(yīng)用持續(xù)拓展。在類器官構(gòu)建中，將其與腸上皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞共培養(yǎng)，可形成具有腸道組織結(jié)構(gòu)的三維腫瘤模型，更真實(shí)地模擬體內(nèi)腫瘤微環(huán)境，用于研究腫瘤細(xì)胞與周圍細(xì)胞的相互作用；在單細(xì)胞測序研究中，解析其異質(zhì)性亞群，發(fā)現(xiàn)高表達(dá) CD44 的細(xì)胞亞群具有更強(qiáng)的成瘤能力和耐藥性，為識別結(jié)直腸癌干細(xì)胞提供了標(biāo)志物；在基因編輯領(lǐng)域，利用 CRISPR 技術(shù)敲入熒光蛋白基因，可實(shí)時追蹤腫瘤細(xì)胞在體內(nèi)的轉(zhuǎn)移路徑，為研究轉(zhuǎn)移機(jī)制和評估抗轉(zhuǎn)移藥物療效提供可視化工具。
以上信息僅供參考，詳細(xì)信息請聯(lián)系我們。
采購中心
化工儀器網(wǎng)