自噬介紹

  自噬（Autophagy）是細胞內物質降解的代謝過程。細胞接受自噬誘導信號后，在胞漿被降解物的周圍形成一個雙層或多層的扁平杯狀分隔膜，分隔膜逐漸延伸、彎曲，將要被降解的胞漿成分*包繞隔離開形成自噬體( autophagosome) ，自噬體形成后通過細胞骨架微管系統將其包裹物運至溶酶體內融合形成自噬溶酶體（autolysosome)，最終將胞漿成分降解、實現再循環，以維持細胞自身的穩定（如圖）。

圖1. 自噬的發生過程

產品介紹

 LC3是自噬標志物。自噬發生初期，胞漿型LC3（即LC3-I）會酶解掉一小段多肽，轉變為膜型LC3（即LC3-II），并引導Stub-RFP-Sens-GFP聚集在自噬體上，熒光顯微鏡下可觀察到紅色/綠色共定位的點狀聚集。自噬發生后期，溶酶體與自噬體融合形成自噬溶酶體，環境pH值發改變。而Sens-GFP綠色熒光蛋白對酸性環境敏感，當環境當環境 pH<5時Sens-GFP 熒光發淬滅，只能檢測到紅色熒光點狀聚集。

圖2. 自噬載體圖譜

宇玫博（Umibio）自噬慢病毒是一種經專門優化設計，用來監控細胞自噬流的慢病毒工具產品。其融合蛋白元件包含紅色熒光蛋白Stub-RFP、綠色熒光蛋白Sens-GFP和自噬標記蛋白LC3，可監控自噬體及自噬溶酶體的形成。其中Sens-GFP是酸敏感型蛋白，而Stub-RFP則是穩定的熒光蛋白，不受外界影響。

本產品具有以下優點：

• Sens-GFP和Stub-RFP均具有高熒光強度;
• Sens-GFP和Stub-RFP具有低細胞毒性；
• 綠色熒光標記Sens-GFP對pH值更為敏感，在自噬溶酶體中淬滅更*；
• 使用的慢病毒載體感染效率高，可將外源基因有效整合到宿主染色體上，穩定持續表達。

產品應用

使用此產品感染目的細胞72h后，加入誘導劑Rapamycin 誘導24h。

圖3.自噬慢病毒感染目的細胞后區分自噬體與自噬溶酶體

產品信息

    產品名稱：stubRFP-sensGFP-LC3  Lentivirus

    產品貨號：UR53201

    產品規格：200ul/Tube    

    產品滴度：1 x 108 TU/mL

    產品保存：保存于-70℃環境中（若存放于4℃請一周內用完）；

                     若需多次使用，請分裝后存放，避免反復凍融。

產品說明書

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