hs 68細胞|人男性正常生殖細胞系 含STR
- 公司名稱 上海琛藝實業有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號
- 產地
- 廠商性質 生產廠家
- 更新時間 2023/5/10 15:53:05
- 訪問次數 1156
聯系我們時請說明是化工儀器網上看到的信息,謝謝!
供貨周期 | 現貨 | 規格 | T25 10的六次方 |
---|---|---|---|
貨號 | hs 68細胞 | 應用領域 | 醫療衛生,環保,化工,生物產業,石油 |
主要用途 | 醫院及其研究所科研實驗 |
hs 68細胞|人男性正常生殖細胞系 含STR
- 組成:
組份 | 數目 |
細胞 | 1 T-25瓶 |
細胞說明書 | 一份 |
- 細胞簡介:
生長特性: | 貼壁生長
|
細胞來源: | 從ATCC/中科院/協和醫院等地引進 |
培養條件: | 培養基:90%1640培養基 +10%FBS(推薦BI -04-001-1ACS*胎牛血清) 氣相:空氣95%,二氧化碳5% 溫度:37℃ |
培養: |
1.用75%酒精噴灑整個瓶消毒,將其平躺置于培養箱中進行2-3小時的緩沖,.然后置于無菌操作臺,打開瓶口,將其中的培養液去掉,再往其中加入5-6mL新鮮培養基并置于細胞培養箱中培養,根據細胞生長狀況及培養基顏色變化對其進行換液以及傳代; 2.待細胞長滿瓶底面積80%-90%,需要對其進行傳代,第yi次傳代比例為1:2。 3傳代步驟:將0.25%含EDTA胰酶置于37°預熱,倒掉培養瓶中的培養基,往培養瓶中加入1mlPBS,輕晃洗滌后棄去。往瓶中加1ml預熱好的胰酶,置于37°孵育消化(第yi次消化需時常取出置于顯微鏡下觀察,以顯微鏡下細胞觸角回收變圓、輕拍瓶壁見細胞脫落為*消化時間,記錄*消化時間,以便于下次消化),消化好后加入1ml*培養基終止消化。用移液槍輕輕吹打瓶壁上的細胞,使之*脫落,然后收集細胞懸液,1200rpm離心3min,棄上清,加入*培養基重懸細胞,進行傳代。
二、懸浮細胞 1.用75%酒精噴灑整個瓶消毒,然后置于無菌操作臺,打開瓶口,輕輕吹打后,將其中的細胞懸液轉移到離心管中,然后1200rpm離心3min,去上清; 2.將離心好的細胞轉移至T-25瓶中,并加入5-6mL新鮮培養基,然后將其置于細胞培養箱中培養,根據細胞生長狀況及培養基顏色變化對其進行換液(離心后去舊液,加入新鮮培養基); 3.顯微鏡觀察細胞數目比較多時,對其進行傳代,第yi次傳代比例為1:2(離心后平均分成兩瓶培養)。
|
細胞總數: | 1~3*106 |
傳代周期: | 2-3天 |
傳代比例: | 1:2~1:4 |
換液頻率: | 2-3天 |
凍存液: | 90%FBS+10%DMSO |
四、注意事項:
1 收到細胞后首先觀察T-25瓶是否有損壞、漏液、渾濁等現象,若有上述現象發生請及時和我們聯系。
2 瓶中運輸的培養液不能重復使用,請換新鮮培養液培養
3 對于貼壁細胞,若大部分細胞漂浮,置于培養箱隔夜觀察,大部分漂浮細胞重新貼壁,表明細胞活力正常,繼續培養,剩余漂浮的細胞可以去掉;若大部分細胞仍然不貼壁,將漂浮的細胞離心收集,用臺盼藍染色鑒定細胞活力,并與本公司銷售人員及時聯系。
4 建議客戶收到細胞后不同倍鏡各拍幾張細胞的照片,記錄細胞狀態,如細胞狀態出現問題請于72h內與本公司銷售聯系,以便于更好的幫您解決問題,超過時間我段,本公司則默認細胞狀態良好,不免費對后續細胞狀態問題進行售后。
hs 68細胞|人男性正常生殖細胞系 含STR-如何培養該細胞?
細胞培養是當前細胞生物學乃至整個生命科學研究與生物工程中基本的實驗技術。
細胞培養為疫苗生產、藥物研制與腫瘤防治等醫學實踐提供了全新的手段。細胞培養包括原核生物細胞,入細菌;真核單細胞生物,入酵母菌、四膜蟲等;植物細胞與細胞的培養以及于此密切相關的病毒的培養。
細胞培養
體外培養的細胞可分為原代細胞(primary culture cell)與傳代細胞(subculture cell)。原代細胞是指機體取出后立即培養的細胞。有人把培養的第1代細胞與傳10代以內的細胞統稱為原代細胞培養,適應在體外培養下條件下持續傳代培養的細胞稱為傳代細胞。
分散的細胞懸液在培養瓶中很快(在幾十分鐘至數小時內)就貼附在瓶壁上,這就稱為細胞貼壁。
分散呈圓球形的細胞一經貼壁就迅速鋪展并開始有絲分裂,逐漸形成致密的細胞單層,稱為單層細胞(sigle layer cell),這種培養方法稱為單層細胞培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
如果漂浮的死細胞多,說明細胞有很多老化的,建議每次傳代的時候,在用胰酶消化之前,用PBS將細胞漂洗一遍,胰酶消化的時間要把握好,37℃2-3min即可,及時終止反應,否則胰酶消化過度對細胞損傷較大,也會有很多死細胞出現的;吹打細胞的動作要輕柔。
體外培養的細胞,不論是元代細胞還是傳代細胞一般不包吃體內原有的細胞形態。但大體可以分為兩種基本形態:成纖維樣細胞(fibroblast like cell)與上皮樣細胞(epitbelial like cell)。此外還有一些可移動的游走細胞。
做細胞實驗的同學看過來。
選擇上海琛藝生物細胞有3個理由:
1、細胞狀態好,形態佳,易成活,是市面上比較好養的細胞之一;
2、物流迅速,復蘇好后發貨,次日就能到;
3、使用我司推薦的進口品牌血清進行培養實驗,效果更佳