iTRAQ簡述-輝駿生物

iTRAQ (Isobaric tag for relative and absolute quantitation，iTRAQ）是由AB SCIEX公司研發(fā)的一種體外同重同位素標(biāo)記的相對與定量技術(shù)。該技術(shù)利用同位素試劑可同時標(biāo)記8個多肽樣品，標(biāo)記的多肽樣品等量混勻后，經(jīng)液相色譜分離及串聯(lián)質(zhì)譜（MS/MS）分析，可得到各肽段的一、二級質(zhì)譜信息。一級質(zhì)譜中，不同樣品來源的同一肽段表現(xiàn)出相同的質(zhì)荷比；二級質(zhì)譜中，肽段碎片離子的質(zhì)荷比及8種iTRAQ報告離子的信號強度，包含了肽段的序列信息及該肽段在不同樣品中的相對表達量信息，通過生物信息學(xué)分析即可鑒定出所測蛋白及其在各樣品中的表達差異。

iTRAQ技術(shù)在微生物抗協(xié)迫機制和動植物發(fā)育分化機理研究及醫(yī)學(xué)生物標(biāo)記物篩選領(lǐng)域都有廣泛應(yīng)用。

iTRAQ技術(shù)原理-輝駿生物    

iTRAQ試劑由三部分組成：報告基團、平衡基團和肽反應(yīng)基團。

報告基團有8種分子量，范圍從113到121（無120）；平衡基團也8有種不同的分子量，與不同的報告基團搭配，能保證被標(biāo)記的不同來源的同一肽段在一級質(zhì)譜中具有相同的質(zhì)荷比；肽反應(yīng)基團能與肽段N端及賴氨酸側(cè)鏈氨基發(fā)生共價連接使肽段連上標(biāo)記。

一級質(zhì)譜中，任何一種iTRAQ試劑標(biāo)記的不同樣品中的同一肽段表現(xiàn)出相同的質(zhì)荷比；二級質(zhì)譜中，化學(xué)鍵斷裂釋放出iTRAQ報告離子，在質(zhì)譜低質(zhì)量區(qū)產(chǎn)生了8個報告離子峰，其強度反應(yīng)了該肽段在不同樣品中的相對表達量信息，另外二級質(zhì)譜中的肽段碎片離子峰質(zhì)荷比反應(yīng)了該肽段的序列信息；這些質(zhì)譜原始數(shù)據(jù)經(jīng)過數(shù)據(jù)庫檢索，可得到蛋白質(zhì)的定性和相對定量信息。

iTRAQ技術(shù)優(yōu)勢-輝駿生物

1.靈敏度高：低豐度蛋白也能檢測出；

2. 適用范圍廣：幾乎可對任何物種的各類蛋白質(zhì)進行分離鑒定；

3. 高通量：能同時對10組樣本中包含的蛋白進行鑒定及表達差異分析；

4. 高效：液相色譜與串聯(lián)質(zhì)譜連用，自動化操作，分析速度快，分離效果好。

iTRAQ技術(shù)服務(wù)流程-輝駿生物

iTRAQ服務(wù)信息-輝駿生物

方案咨詢與送樣須知-輝駿生物

1、方案咨詢：我司將根據(jù)您的研究目為您設(shè)計合理的iTRAQ實驗方案，具體請聯(lián)系我司。

2、送樣須知：樣本應(yīng)避免污染和反復(fù)凍融，需用液氮或干冰保存寄送；廣州的客戶可上門收樣。

注：iTRAQ試劑可以標(biāo)記任何類型的蛋白樣本，如組織、細(xì)胞、細(xì)菌等材料。因此我司接受多種類型的樣本，但對于不同類型的樣本需要量有所不同，具體請咨詢我司。

iTRAQ實驗服務(wù)報告內(nèi)容-輝駿生物

1、蛋白定鑒定和定量分析結(jié)果；

2、顧客蛋白質(zhì)對應(yīng)的質(zhì)譜峰圖；

3、實驗完整的實驗步驟、使用儀器、軟件檢索參數(shù)等。

iTRAQ實驗服務(wù)案例-輝駿生物