猴Ⅰ型膠原N末端肽（NTX）elisa試劑盒

目的:因腫瘤,感染,生理功能減退等多種原因導致的組織缺損發病率很高,使用具有良好引導組織再生作用的膠原材料治療是一種行之有效的方法,而對其免疫原性的控制是該類材料制備工藝的關鍵所在,目前尚無相關國家標準.本研究利用無花果蛋白酶去除牛腱Ⅰ型膠原蛋白末端肽,并對其去除效果進行驗證.rn 方法:采用一定濃度無花果蛋白酶對牛腱腱片進行酶解,并在不同作用時間收集酶解液,使用ELISA試劑盒應用雙抗體夾心法測定溶液中C,N末端肽(NTX和CICP)水平,觀察無花果蛋白酶對膠原蛋白末端肽的去除效果.rn 結果:在初始時,實驗組隨時間增加NTX,CICP濃度不斷增加,至第16h達到0.476±0.042 nmol/L后濃度不再變化,第16,18,20,22 h與空白對照組比較有顯著性差異(P<0.05).rn 結論:牛腱Ⅰ型膠原NTX和CICP在無花果蛋白酶作用下經16h即*酶解,采用此酶解工藝生產的膠原類產品可*醫用植入性材料對免疫原性的控制要求.

背景:Ⅰ型膠原蛋白的免疫原性主要分布在分子鏈的端肽區域,可在膠原蛋白提取過程中通過水解或是去除而使其失活,制備去端肽Ⅰ型膠原蛋白,降低其免疫原性.目的:評價去端肽Ⅰ型膠原蛋白的免疫原性.方法:采用酶切,鹽析,透析工藝制備去端肽Ⅰ型膠原蛋白,通過考馬斯亮藍對牛血清白蛋白染色極限的分析,鑒定去端肽Ⅰ型膠原蛋白的純度,依據YY/T 0606.25-2014中規定的方法,利用Quant-IT PicoGreendsDNA Reagent and Kits試劑盒測定去端肽Ⅰ型膠原蛋白的DNA殘留量,利用ELISA試劑盒分析去端肽Ⅰ型膠原蛋白的端肽去除效果,依據YY/T 1561-2017標準檢測去端肽Ⅰ型膠原蛋白的α-Gal抗原含量.結果與結論:去端肽Ⅰ型膠原蛋白的純度可達99.8%,DNA殘留量為4μg/g,C,N末端肽濃度低于試劑盒檢測限,α-Gal抗原含量低于檢測限.通過酶切,鹽析,透析工藝制備的去端肽Ⅰ型膠原蛋白,可顯著去除天然膠原蛋白的免疫原性根源,有效控制膠原蛋白臨床應用的免疫原性風險.猴Ⅰ型膠原N末端肽（NTX）elisa試劑盒