猴活化蛋白C（APC）elisa試劑盒

肺炎是兒童見(jiàn)的感染性疾病之一,也是引起兒童死亡的主要原因。細(xì)菌、病毒、支原體、衣原體等病原體均可導(dǎo)致肺炎。肺炎主要侵犯終末氣道、肺泡和肺間質(zhì)。肺炎患者如果不及時(shí)治療,容易發(fā)展為重癥肺炎,引發(fā)各種并發(fā)癥,甚至?xí)?dǎo)致死亡。有研究證實(shí),炎癥細(xì)胞因子在重癥肺炎的發(fā)生發(fā)展中占有重要地位。因此了解兒童肺炎的發(fā)病原因以及探討其治療方法,對(duì)于提高肺炎*、降低死亡率,改善兒童的健康水平有著重大的意義。本研究將觀察白介素1受體1型(IL-1R1)和活化蛋白C(APC)在重癥肺炎患兒血清中的動(dòng)態(tài)變化,進(jìn)而探討其在疾病診斷和治療方面的臨床意義。目的:采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)雙抗體夾心(ELISA)方法檢測(cè)重癥肺炎患兒血清IL-1R1和APC水平。觀察重癥肺炎患兒入院1天、3天、7天血清IL-1R1和APC的動(dòng)態(tài)變化,探討IL-1R1和APC在兒童重癥肺炎臨床診斷和治療中的意義。方法:1實(shí)驗(yàn)分組:實(shí)驗(yàn)組收集河北省兒童醫(yī)院重癥醫(yī)學(xué)科2014年1月至2015年1月收治的重癥肺炎患兒,依據(jù)諸福棠《實(shí)用兒科學(xué)》(第七版)重癥肺炎的診斷標(biāo)準(zhǔn),依據(jù)患兒的病史、臨床表現(xiàn)、胸片、生化檢查,細(xì)菌學(xué)檢測(cè)結(jié)果確定診斷。共收集重癥肺炎患兒30例,年齡1個(gè)月到3歲10個(gè)月,男19例,女11例;根據(jù)入院時(shí)間第1天、第3天、第7天分為3組。

目的 1.研究aPC對(duì)PAN誘導(dǎo)的足細(xì)胞凋亡的影響. 2.探索aPC抗足細(xì)胞凋亡的作用機(jī)制. 3.探討aPC和PAR-3下游信號(hào)通路在抗足細(xì)胞凋亡中的可能作用. 方法 1.用TUNEL凋亡試劑盒檢測(cè)不同濃度aPC對(duì)PAN誘導(dǎo)的人足細(xì)胞凋亡的影響,同時(shí)在封閉抗體及Aptamer的干預(yù)下檢測(cè)aPC抗凝血作用對(duì)足細(xì)胞凋亡的影響. 2.應(yīng)用RT-PCR, Western Blot,免疫熒光技術(shù)對(duì)足細(xì)胞相關(guān)基因(Thbd,PAR-1,PAR-2,PAR-3,PAR-4,EPCR)表達(dá)譜及蛋白質(zhì)表達(dá)譜進(jìn)行分析. 3.運(yùn)用相關(guān)受體特異激動(dòng)劑及封閉抗體進(jìn)行干預(yù),篩選出參與aPC影響足細(xì)胞凋亡關(guān)鍵受體,進(jìn)一步運(yùn)用shRNAmir gene Knock Down技術(shù)證實(shí)篩選關(guān)鍵受體的正確性. 4.在不同刺激下(aPC,TRAP-3,Thrombin),用熒光顯微鏡持續(xù)記錄鈣敏感的熒光染料(Fura-2 AM)標(biāo)記的足細(xì)胞,檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)鈣離子的變化. 5.借助免疫共沉淀技術(shù)研究相關(guān)受體作用的時(shí)效性. 6.采用分子生物學(xué)技術(shù)構(gòu)建表達(dá)V5指示蛋白標(biāo)記的野生型PAR-3載體,用定點(diǎn)突變?cè)噭┖袠?gòu)建PAR-3相關(guān)突變型載體并用其轉(zhuǎn)染腎小球系膜細(xì)胞系,建立相應(yīng)穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞系檢測(cè)aPC和PAR-3的相互作用以及對(duì)凋亡的影響. 7.運(yùn)用Western Blot,免疫共沉淀技術(shù)針對(duì)可能會(huì)參與aPC對(duì)凋亡調(diào)控的信號(hào)通路Caveolae, RhoA及ERK1/2等進(jìn)行相關(guān)活性檢測(cè). 猴活化蛋白C（APC）elisa試劑盒?