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| CAS | 原裝,質量問題包退換 | 純度 | 99.5% |
|---|---|---|---|
| 分子量 | 咨詢 | 分子式 | 咨詢 |
| 供貨周期 | 一周 | 規格 | 48/96 |
| 貨號 | 70296 | 應用領域 | 生物產業 |
| 主要用途 | 科研實驗 |
目的:本實驗為了證明心肌細胞是兒茶酚胺誘導產生的β-半乳糖苷酶的一個重要來源,從而為抗炎以及抗心肌纖維化提供新的藥物靶點. 方法:用逆轉錄PCR檢測在成年大鼠心室肌細胞,新生鼠心肌成纖維細胞及巨噬細胞系RAW264.7中β-半乳糖苷酶mRNA的表達.用X-gal和鼠β-GALELISA試劑盒檢測異丙腎上腺素刺激后的不同細胞,血清和心臟組織勻漿物中β-半乳糖苷酶的表達.用異丙腎上腺素誘導造心肌炎癥和心肌纖維化模型.蘇木精-伊紅染色和天狼星紅染色觀察組織學變化,同時用X-gal觀察組織學β-半乳糖苷酶的表達. 結果:以B淋巴細胞系DT40做陽性對照...
猴β-半乳糖苷酶（β-GAL）elisa試劑盒目的:構建調控β-半乳糖苷酶(β-gal)基因表達的四環素基 因表達調控載體,驗證其在肝癌細胞內調控β-半乳糖苷酶基因的表達,為進一步利用該調控系統調控治療基因治療肝癌奠定實驗基礎.方法:根據2個四環素調控 子結合位點(TetO2)基因與pcDNA3.1載體的基因核苷酸序列,設計引物,以pcDNA3.1載體為模板進行PCR.將具有串聯2個四環素調控子 結合位點(Tet02)基因的PCR產物連接入pcDNA3.1載體CMV啟動子下游,構建成pcDNA3.1-Tet02載體,應用ABI 3130測序儀利用pcDNA3.1-TetO2載體對TetO2PCR產物進行測序分析.再將p-gaI克隆入pcDNA3.1-TetO2載體,構建 成受四環素調控表達的β-半乳糖苷酶基因的表達載體pcDNA3.1-TetO2-β-gal.利用脂質體將攜帶四環素調控子基因(TR)的 pcDNA6/TR載體轉染到肝癌細胞HepG2中,利用殺稻瘟菌素進行細胞轉染的穩定篩選,采用逆轉錄聚合酶鏈反應(RT-PCR)法檢測TR基因在 HepG2細胞內的表達.將pcDNA3.1-TetO2-β-gal載體轉染到穩定表達.pcDNA6/TR的HepG2細胞中,轉染3～4 d后,給予強力霉素(4 mg·L-1),利用β半乳糖苷酶原位染色試劑盒染色,檢測β-半乳糖苷酶基因的表達.結果:構建的pcDNA3.1-TetO2載體測序結果表明,串聯 2個四環素調控子結合位點(TetO2)基因片段插入到pcDNA3.1載體CMV啟動子基因下游
目的:構建調控β-半乳糖苷酶(β-gal)基因表達的四環素基 因表達調控載體,驗證其在肝癌細胞內調控β-半乳糖苷酶基因的表達,為進一步利用該調控系統調控治療基因治療肝癌奠定實驗基礎.方法:根據2個四環素調控 子結合位點(TetO2)基因與pcDNA3.1載體的基因核苷酸序列,設計引物,以pcDNA3.1載體為模板進行PCR.將具有串聯2個四環素調控子 結合位點(Tet02)基因的PCR產物連接入pcDNA3.1載體CMV啟動子下游,構建成pcDNA3.1-Tet02載體,應用ABI 3130測序儀利用pcDNA3.1-TetO2載體對TetO2PCR產物進行測序分析.再將p-gaI克隆入pcDNA3.1-TetO2載體,構建 成受四環素調控表達的β-半乳糖苷酶基因的表達載體pcDNA3.1-TetO2-β-gal.利用脂質體將攜帶四環素調控子基因(TR)的 pcDNA6/TR載體轉染到肝癌細胞HepG2中,利用殺稻瘟菌素進行細胞轉染的穩定篩選,采用逆轉錄聚合酶鏈反應(RT-PCR)法檢測TR基因在 HepG2細胞內的表達.將pcDNA3.1-TetO2-β-gal載體轉染到穩定表達.pcDNA6/TR的HepG2細胞中,轉染3～4 d后,給予強力霉素(4 mg·L-1),利用β半乳糖苷酶原位染色試劑盒染色,檢測β-半乳糖苷酶基因的表達.結果:構建的pcDNA3.1-TetO2載體測序結果表明,串聯 2個四環素調控子結合位點(TetO2)基因片段插入到pcDNA3.1載體CMV啟動子基因下游猴β-半乳糖苷酶（β-GAL）elisa試劑盒
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