牛α干擾素（IFN-α）elisa試劑盒本文探討聚合體形式的豬干擾素α真核表達質粒(pVAX1-PIFNα)對豬PRRSV弱毒疫苗免疫作用的增強作用.在豬免疫PRRSV弱毒疫苗的同時,注射pVAX1-PIFNα重組表達質粒與多聚賴氨酸(PLL)的聚合體(PLL-pVAX 1-PIFNα),以研究聚合體狀態的干擾素對PRRSV免疫的增強作用.將分泌表達干擾素α的重組真核表達質粒pVAX1-PIFNα與PL聚合,同時免疫PRRSV弱毒疫苗和PLL-pVAX1-PIFNα聚合體,使用ELISA試劑盒檢測PRRSV中和抗體;另外,分離培養豬外周血白細胞(PBMC)進行體外試驗,分析PLL-pVAX1-PIFNα聚合體刺激淋巴細胞后IFN-γ的分泌情況.中和抗體的結果表明,PLL-pVAX1-PIFNα的使用可明顯提高PRRSV活疫苗誘導產生PRRSV中和抗體的能力;細胞試驗的結果表明,經PLL-pVAX1-PIFNα刺激后,明顯提高了淋巴細胞分泌表達IFN-γ的水平.在PRRSV疫苗免疫中,聚合體狀態的豬IFNα重組表達質粒可有效提高機體的體液免疫和細胞免疫水平,這一結果也為干擾素或其他重組蛋白在疫苗免疫中的應用提供了新的思路.

以純化的rHis-BoIFN-γ制備兔多抗血清,辛酸—硫酸銨兩步法對體內誘生的抗rBoIFN-γ單抗腹水進行純化,用美洲商陸素(Pokeweed mitogen,PWM)刺激奶牛全血產生的分泌性天然BoIFN-γ篩選出與之反應的單抗5E11.將單抗5E11以40μg/mL濃度包被,與1:3 000倍稀釋的兔抗rHis-BoIFN-γ多抗血清(13.8μg/mL)配對,以1:6 000稀釋的商品化酶標羊抗兔IgG為指示抗體,建立了BoIFN-γ抗原捕獲ELISA檢測方法,該方法可以檢出2.56 U/100μL(30.5 pg/100μL)的rHis-BoIFN-γ,8U/100μL的rBac-BoIFN-γ和1U/100μL的分泌性天然BoIFN-γ.以商品化試劑盒作為平行對照,將獲得的奶牛臨床檢測血漿樣品使用BoIFN-γ抗原捕獲ELISA法進行檢測,結果顯示兩種方法檢測符合率達到83.9%.本研究建立的BoIFN-γ抗原捕獲ELISA檢測方法可有效檢測分泌性IFN-γ,為進一步開發BoIFN-γELISA檢測試劑盒奠定了基礎.牛α干擾素（IFN-α）elisa試劑盒