將 蛋白轉運抑制劑（含布雷菲德菌素 A）添加到體外或體內刺激的淋巴細胞中，阻斷其細胞內蛋白質轉運過程。這導致細胞因子和/或蛋白質在高爾基復合體中積累。細胞因子在細胞中積累的增加增強了免疫熒光染色和流式細胞術分析對產生細胞因子的細胞的可檢測性。

推薦的實驗流程 刺激細胞：已經報道了各種體外方法，用于刺激細胞產生細胞因子。多克隆激活劑對于誘導產生細胞因子的細胞特別有用。這些激活劑包括：伴刀豆球蛋白 A、脂多糖、佛波酯加鈣離子載體或離子載體或離子霉素、植物血凝素、葡萄球菌、腸毒素 B 和針對 TCR/CD3 復合物亞基的單克隆抗體（有或沒有針對共刺激受體的抗體，如 CD28）。 BD GolgiPlug™的使用程序：每1 ml細胞培養物中加入1 μl BD GolgiPlug™（例如，~10^6個細胞/mL）并充分混合。用BD GolgiPlug™處理受刺激的細胞4至6小時，可顯著提高通過免疫熒光染色檢測產生細胞因子的細胞的能力。建議BD GolgiPlug™在細胞培養物中的保存時間不要超過12小時。 作為 BD GolgiPlug™ 的替代品，研究人員可能希望考慮使用 BD GolgiStop™，這是一種含有莫能菌素的蛋白質轉運抑制劑（Cat.第 554724 號）。已發現 BD GolgiPlug™ 和 BD GolgiStop™ 對細胞內細胞因子染色具有不同的影響，即時間、激活劑和細胞因子依賴性。在進行細胞內細胞因子染色時，需要考慮這些因素。

蛋白轉運抑制劑（含布雷菲德菌素 A）

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