電穿孔是功能強大的將核酸、蛋白及其它分子導入多種細胞的高效技術。通過高強度的電場作用,瞬時提高細 胞膜的通透性,從而吸收周圍介質中的外源分子。這種技術可以將核苷酸、DNA 與RNA、蛋白、糖類、染料及病 毒顆粒等導入原核和真核細胞內。電轉化相對其它物理和化學轉化方法,是一種有價值和有效的替代方法。 Gene Pulser Xcell 系統的設計,基于Bio-Rad 15 年來在電轉化技術上經驗積累,它提供指數波和方波波型選擇、 系統配置選擇及友好的用戶界面。 主要特點 - 指數波和方波波型確保所有細胞類型(原核及真核)均可獲得* 的電轉化效果
- Bio-Rad 的* PulseTrac 電路和電弧保護設計,確保可重復性 并保護樣品
- 模塊化設計可根據研究需要選擇系統
- 用戶友好的數字化界面,具有直觀的編程以控制所有參數, 包括附屬模塊的參數
- 包括人工操作、預設規程、用戶規程、一個優化規程及其它* 功能等程序選擇
* 美國4,750,100 和4,910,140。 指數波或方波脈沖選擇 Gene Pulser Xcell 系統可產生指數波和方波波型,使你選擇zui 適合你細胞的波型與規程。指數波和方波均能有效地用于電轉化及 電融合。電穿孔波型對不同類型細胞的轉化效率有很重要的影響。 左,指數衰變脈沖。當一個充電至電壓為V 0 的電容器放 電到細胞,加在細胞上的電壓隨時間以指數方式下降。從 起始電壓下降到V0 / e 所需的時間稱為為時間常數τ, 一 種方便的脈沖時間表達方式。 右,方波脈沖。放電到樣品后截斷電容器脈沖可產生方 波脈沖。脈沖時間為細胞被放電的時間。所有方波設備都 會產生細微的電壓下降。這種電壓下降稱為脈沖下垂,并 以起始電壓的百分比計量。 PulseTrac 電路和電弧保護提供可靠的、可重復的和安全的性能 Bio-Rad *的微處理器控制電路能為任何規程提供可重復的結果,無論使用何種介質,它所產生的電壓 值可在*范圍內測試。PulseTrac 電路和電弧保護: - 確保電壓準確地傳送到電擊杯
- 把CE 模塊中的低壓電容器精確度從20% 提升到10%
- 便于電容器再校正,以保持精確的脈沖指標,修正電容器隨著時間而發生的偏移
- 提供脈沖前樣品電阻測量
- 當脈沖或電路中斷時,可安全地自動放電
- 降低電弧危險,保護設備及樣品
用戶友好界面,便于編程和控制 主單元上的圖形界面可控制包括任何連接的附屬模塊在內的所有功能。界面由一個通過功能鍵和字母數字鍵盤 操作的屏幕組成。根據屏幕提示進行簡便而直觀的編程。屏幕用于編程和顯示儲存與設定的程序、運行參數以及波 型。規程包括: - 人工編程以輸入或編輯方波或指數衰變脈沖的所有參數
- 輔助編程需要的時間常數
- 預設有適合常用細菌、真菌和哺乳動物細胞株的優化程序
- 優化規程
- 根據不同的波型選擇,顯示時間常數、實際電壓、脈沖間隔和脈沖時間等參數
- 儲存和調用* 個實驗的脈沖參數
預優化規程,可快速選擇程序 這項功能為每個細胞株提供一組的預優化參數。 提供以下細胞株的預設程序 哺乳動物 | 細菌 | 真菌 | CHO | Escherichia coli | Saccharomyces cerevisiae | COS-7 | Agrobacterium tumefaciens | Pichia pastoris | 3T3 | Pseudomonas aeruginosa | Candida albicans | 293 | Staphylococcus aureus | Schizosaccharomyces pombe | HeLa | Bacillus cereus | Dictyosium discoideum | BHK21 | Streptococcus pyrogenes | | A549 | Lactobacillus plantarum | | CV1 | | | K562 | | | HL60 | | | Jurkat | | | HuT78 | | | 這些細胞株的詳細參數及制備電感受態細胞的詳細信息可查詢Gene Pulser Xcell 系統指導手冊或 discover.bio-rad.com 。 選擇你所需要的系統 Gene Pulser Xcell 是由一個主單元、2 個附屬模塊(CE 與PC 模塊)及ShockPod 電擊槽組成的模塊式電穿 孔系統。CE 模塊與Gene Pulser Xcell 主單元配合使用可電轉化多數真核細胞(包括哺乳動物細胞和植物原生質 體)。PC 模塊建議用于細菌和真菌的電轉化,或其它需要在小體積和高電阻樣品上施加高電壓脈沖的應用。系統有 3 種組合。 Gene Pulser Xcell 選擇系統 系統 | 內容 | Gene Pulser Xcell *系統 | *系統包括PC 模塊和CE 模塊,具有用指數波或方波脈沖轉化真核與原核細胞的完整功能。 | Gene Pulser Xcell 真核系統 | 真核系統由主單元及CE 模塊組成,可電轉化哺乳動物細胞和植物原生質體。CE 模塊具有25-3,275 µF 跨度,提供了一種通過增加脈沖時間常數來控制電路電容的方法。對于方波脈沖,CE 模塊能提供從傳送方波脈沖到低電阻介質所需的大電容。 | Gene Pulser Xcell 微生物系統 | 微生物系統由主單元及PC 模塊組成,可電轉化細菌和真菌,或其它需要在小體積和高電阻樣品上施加高電壓脈沖的應用。通過將電阻器與樣品并聯放置,PC 模塊可控制電路電阻,從而提供了一種減少指數衰變脈沖時間常數的方法。 | ShockPod 電擊槽可更簡單快速地處理樣品 創新的ShockPod 槽設計適合單手操作,可快速而簡便地單手操作一個電 擊杯。只需抓住ShockPod 前部就能打開槽蓋。電擊杯狹槽的設計可確保電擊 杯只能以正確的方向插入。 ShockPod 擁有安全的聯鎖裝置,避免ShockPod 打開時脈沖傳送到電 擊杯。 | | |
Systems | 165-2660 | Gene Pulser Xcell Total System, for mammalian and microbial cells, 100/240 V, 50/60 Hz, exponential and square-wave delivery, includes main unit, CE module, PC module, ShockPod chamber, 15 sterile cuvettes (5 each of 0.1, 0.2, and 0.4 cm gap), instructions | 165-2661 | Gene Pulser Xcell Eukaryotic System, 100/240 V, 50/60 Hz, exponential (25–3,275 µF range) and square-wave delivery, includes main unit, CE module, ShockPod chamber, 5 sterile cuvettes (0.4 cm gap), cuvette rack, instructions | 165-2662 | Gene Pulser Xcell Microbial System, 100/240 V, 50/60 Hz, exponential decay delivery, includes main unit, PC module, ShockPod chamber, 10 sterile cuvettes (5 each of 0.1 and 0.2 cm gap), cuvette rack, instructions | Components | 165-2666 | Gene Pulser Xcell Main Unit, 100/240 V, 50/60 Hz | 165-2667 | Gene Pulser Xcell CE Module, 25–3,275 µF range controlled by main unit, includes integral leads | 165-2668 | Gene Pulser Xcell PC Module, 50–1,000 ohm range controlled by main unit, includes integral leads | 165-2669 | Gene Pulser Xcell ShockPod Cuvette Chamber, includes integral leads for connection to Gene Pulser Xcell, Gene Pulser II, or MicroPulser electroporators | |