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武漢原生原代生物醫藥科技有限公司

PriCells: 原代細胞的脂類染色方法蘇dan紅Ⅲ染色法

時間:2021-10-15 閱讀:468
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PriCells: 原代細胞的脂類染色方法蘇dan紅Ⅲ染色法
 
原理:
    蘇dan紅染料在脂類物質中的溶解度大于其在溶劑中的溶解度,如果染料與含有脂類的試樣接觸,便有大量染料進入脂類物質的結構內,使這些結構呈紅色。多用蘇dan紅染料、油紅O、尼羅藍等溶于脂類的染料染色,使脂質呈色。也可用四氧hua鋨染色,脂肪酸或膽堿可使四氧hua鋨還原為二氧化鋨而呈黑色。
 
配制試劑:
1.蘇dan紅Ⅲ染色液:將1g蘇dan紅Ⅲ溶于加溫的70%乙醇溶液中過濾備用;
2.甲醛鈣固定液:將10ml甲醛和1g CaCl2混合加水至100ml;
3.甘油明膠:將12g明膠加入120ml蒸餾水中水浴加熱使其*溶解,再加入60ml甘油和1g苯酚,充分混勻后即得。于4℃儲存備用;
 
染色步驟:
1.用Hanks液漂洗蓋玻片3次;
2.用甲醛鈣固定液固定20min;
3.用蒸餾水漂洗蓋玻片3次;
4.用70%乙醇將蓋玻片沖洗3次;
5.用蘇dan紅Ⅲ染色液覆蓋蓋片樣品,染色10—30min;
6.用70%乙醇漂洗蓋片3次;
7.用甘油明膠封片后觀察;
 
結果:
  原代細胞含脂類的區域呈橘紅色;
 
PriCells提供:
1.各種原代細胞特制基礎培養基;
2.各種原代細胞培養特制添加劑;
3.原代細胞分離試劑盒;
4.原代細胞鑒定試劑盒;
5.原代細胞總蛋白質抽提物;
6.原代細胞總RNA;
7.原代細胞總DNA;


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