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武漢原生原代生物醫(yī)藥科技有限公司

PriCells: 蘇木精-伊紅(HE)染色

時間:2021-10-15 閱讀:473
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PriCells: 蘇木精-伊紅(HE)染色
染液制備:
1.      蘇木精染液
(1)    稱取0.5g蘇木精、5.0g銨礬或鉀礬和0.1g碘酸鈉加溫溶于70ml蒸餾水中;
(2)    加入30ml甘油和2ml冰乙酸充分混勻后過濾即成母液;
(3)    母液可長期保存。用蒸餾水以1:20稀釋母液即成工作液。工作液也較長時間儲存,但每次染色前宜過濾,去除氧化膜;
2.      伊紅染液
伊紅有醇溶性與水溶性之分。將0.5g伊紅溶于100ml 70%乙醇或蒸餾水即成工作液;
染色步驟:
1.      用37℃的溫BSS漂洗3次,每次20s—1min;
2.      用中性福爾馬林固定30min;
3.      用蒸餾水漂洗1次,再用蒸餾水稀釋的蘇木jing液(1/20)染10min;
4.      先用自來水沖洗幾次,而后置入1% NaHCO3液中漂洗至藍(lán)紫色;
5.      在放入伊紅水溶液中染30s—1min;
6.      用蒸餾水沖洗,迅速通過丙酮2次,每次3—5min;
7.      通過2:1丙酮/二甲苯3次,每次1—2min;
8.      通過1:2丙酮/二甲苯3次,每次1—2min;
9.      放入純二甲苯5—10min,用光學(xué)樹脂封片后觀察;
10.    把蓋片置載物玻片上,令小蓋片細(xì)胞面向上,用樹膠封存,再覆以較大蓋片;
結(jié)果:
原代細(xì)胞核染成紅色,胞質(zhì)染成藍(lán)紫色;



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