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酶學檢測和ELISA支原體常用檢測方法

來源:上海一研生物科技有限公司   2015年05月15日 10:50  

DNA檢測
 
DNA檢測需要將可疑樣品與指示細胞共同培養,ELISA試劑盒因此一般需要幾天時間。DNA檢測所用的指示細胞通常是細胞質區域較大的Vero細胞,如果原樣本中含有支原體,那么當細胞DNA被熒光染料(如Hoechst染料)染色時,就可以在指示細胞的核周圍觀察到熒光斑點或熒光顆粒。分離培養法用來檢測支原體M. hyorhinis菌株并不可靠,而DNA法可以準確的將其檢測出來。
 
PCR法
 
PCR法也可以檢測M. hyorhinis菌株,PCR法檢測支原體只需幾個小時,是zui快但也是zui不靈敏的支原體檢測方法。該方法采用針對支原體DNA的引物用PCR檢測可疑樣本,其中PCR引物通常針對支原體的16S rRNA基因。在凝膠電泳過程中,支原體DNA會顯示為特異性條帶,以此指示支原體的存在。PCR法可以檢測大多數支原體,但謹慎起見同時使用另一種檢測方法來進行驗證。
 
酶學檢測和ELISA試劑盒
 
此外,也還存在一些其他支原體檢測方法。例如酶學檢測是將可疑樣本添加到特定底物中,在這一體系內支原體的酶可以將ADP轉化為ATP,隨后能利用ATP發光的luciferase酶就可以指示支原體的存在。ELISA也能用于支原體檢測,以ELISA法為基礎的支原體檢測一般使用針對支原體16S rRNA基因的帶標記探針或抗體,來檢測培養物中是否含有支原體。
 
定期檢測
 
支原體感染會使培養細胞慢慢枯萎,因此對培養細胞定期進行支原體檢測非常重要。一般來說每1至3個月就應該進行一次支原體檢測。將定期支原體檢測常規化堅持下去,是細胞培養實驗室應對支原體感染的關鍵。

110892-200403 積雪草苷 對照品 鑒別 20mg
110893-200201 羥基積雪草苷 對照品 鑒別 20mg
110894-200503 甜菜堿 對照品 含量測定 50mg
110895-200404 雪上一枝蒿甲素 對照品 供比色法含量測定用 20mg
110896-200202 琥珀酸 對照品 鑒別 20mg
110897-200001 α-蒎烯 對照品 含量測定 0.5ml
110898-200202 γ-亞麻酸甲酯 對照品 含量測定 0.2ml
110899-200302 二十八烷醇 對照品 含量測定 10mg
ELISA試劑盒110900-200405 祖師麻甲素 (曾用名:瑞香素) 對照品 含量測定 20mg
111501-200001 尿囊素 對照品 含量測定 50mg
111502-200402 大豆苷元 對照品 鑒別 20mg
111503-200001 芳樟醇 對照品 鑒別 50mg
111504-200001 D-果糖 對照品 鑒別 30mg

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