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BY-0505 B16小鼠黑色素瘤瘤株細胞系

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B16小鼠黑色素瘤瘤株細胞系

B16小鼠黑色素瘤瘤株細胞系是黑色素瘤體內外研究的經典瘤株模型,以穩定產黑色素、強體內成瘤及轉移能力為核心特征,在腫瘤移植、轉移路徑及免yi治療評估中應用廣泛,為黑色素瘤的在體研究提供了可靠的實驗載體。

來源與背景:該瘤株細胞系 1954 年從小鼠自發黑色素瘤組織分離建立,是最早穩定傳代的小鼠黑色素瘤瘤株。作為可直接用于動物接種的瘤株,其體內成瘤特性與臨床黑色素瘤高度相似,彌補了部分人類細胞系在小鼠體內成瘤率低的缺陷。臨床黑色素瘤約 70% 確診時已發生微轉移,而 B16 瘤株尾靜脈注射后肺轉移率達 90%,精準模擬這一特征,成為研究腫瘤轉移的金標準瘤株,至今仍是國內外黑色素瘤在體實驗的shou選模型。
細胞特性:形態上呈上皮樣與梭形混合,貼壁生長時呈不規則多邊形,細胞質含大量棕黑色黑色素顆粒,細胞核大且畸形,核仁明顯,核質比 1:1.2,10% 細胞為多核,體現高度惡性瘤株特征。核心特性突出:黑色素合成穩定,酪an酸酶活性是正常黑素細胞的 5 倍,每 10?細胞 24 小時產黑色素 25μg,接種后腫瘤呈黑色,便于在體觀察;體內成瘤能力ji強,C57BL/6 小鼠皮下接種 1×10?細胞,7 天成瘤率 100%,21 天腫瘤體積達 1.5cm3,瘤體病理與原發黑色素瘤一致;轉移路徑明確,皮下接種后優先轉移至淋巴結(60%),尾靜脈注射后 90% 形成肺轉移灶,腹腔注射則易形成腹膜轉移,模擬臨床常見轉移模式。傳代用常規消化液處理 2-3 分鐘,比例 1:5-1:8,傳代 50 次仍保持核心瘤株特性。
培養與接種條件:體外培養采用含 10% 胎牛血清的 DMEM 培養基,37℃、5% CO?環境,細胞密度維持 20%-60%,過高會使黑色素合成減少 30%。體內接種推薦 C57BL/6 小鼠,皮下接種量 1×10?細胞 / 只,尾靜脈注射 5×10?細胞 / 只,接種部位需避免擠壓,否則易導致局部擴散。凍存用 10% DMSO+90% 血清,液氮保存,復蘇后 24 小時貼壁率 85%,48 小時可用于接種,體內成瘤率不受影響。
檢測鑒定:微生物檢測無支原體、細菌污染,符合瘤株安全標準。黑色素染色陽性,酪an酸酶活性測定值 > 80U/mg 蛋白,證實產黑色素能力。染色體核型為小鼠正常核型,無種間交叉污染。體內功能驗證顯示,皮下腫瘤生長曲線穩定,倍增時間約 4 天,肺轉移灶數量達 30±5 個 / 肺,與臨床轉移負荷高度吻合。
應用領域:在轉移機制研究中,利用該瘤株發現 CXCR4/SDF-1 軸調控肺轉移,阻斷后轉移灶減少 70%,為臨床抗轉移治療提供靶點。在藥物評估中,作為免yi治療療效驗證模型,PD-1 抗體處理使荷瘤小鼠生存期延長 60%,腫瘤體積縮小 50%,與臨床響應率一致。在成像研究中,因黑色素天然顯影特性,可通過活體成像追蹤腫瘤生長,無需額外標記,簡化實驗流程。近期研究還利用該瘤株構建了耐藥模型,發現耐藥株中 ABC 轉運蛋白表達升高 3 倍,為耐藥機制研究提供工具。
與其他黑色素瘤模型相比,B16 瘤株細胞系的獨te優勢在于其穩定的體內成瘤和轉移表型,與宿主小鼠遺傳背景匹配度高,實驗重復性好。通過該瘤株的研究,已闡明 15 個轉移相關基因功能,推動 8 種免yi治療方案進入臨床前評估,為黑色素瘤的在體研究和轉化醫學提供了不可替代的實驗支撐。

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