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BY-0505 B16小鼠黑色素瘤細胞系

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B16小鼠黑色素瘤細胞系

B16小鼠黑色素瘤細胞系系是研究黑色素瘤生物學特性的標gan模型,以穩定產生黑色素、強侵襲轉移能力及低免疫原性為核心特征,在黑色素瘤發生機制、轉移規律及免yi治療策略開發中應用廣泛,為該惡性腫瘤的基礎研究與臨床轉化提供了可靠實驗載體。

來源與背景:該細胞系于 1954 年從小鼠自發黑色素瘤組織中分離建立,是目前應用zui廣泛的小鼠黑色素瘤模型。黑色素瘤作為一種高度惡性的皮膚腫瘤,其轉移率高、預后差,而 B16 細胞系的建立為研究黑色素瘤的惡性生物學行為提供了理想工具。與人類黑色素瘤細胞系相比,B16 細胞系在小鼠體內的成瘤和轉移特性更接近臨床黑色素瘤的發展過程,尤其適合進行體內實驗研究,如腫瘤轉移路徑追蹤、藥物療效評估等。經過多年傳代,該細胞系仍保持穩定的生物學特性,至今仍是黑色素瘤研究領域的重要實驗材料。
細胞特性:形態上呈現典型的黑色素瘤細胞特征,貼壁生長時多為上皮樣,部分呈梭形,細胞質豐富,因含有黑色素顆粒而呈棕黑色,細胞核大且不規則,核仁明顯,核質比約 1:1.2,可見多核細胞(約 8%),體現高度惡性腫瘤的形態學特征。核心特性包括:產黑色素能力穩定,酪an酸酶活性高,黑色素合成量為每 10?細胞 20-30μg/24h,這一特性使其在體內實驗中易于追蹤;強侵襲轉移能力,體外培養倍增時間約 24-30 小時,克隆形成率約 65%,Transwell 實驗中穿膜細胞數顯著高于其他腫瘤細胞系,尾靜脈注射小鼠后肺轉移率可達 90% 以上;免疫原性低,細胞表面 MHCⅠ 類分子表達量低,能有效逃避小鼠免疫系統的攻擊,皮下接種成瘤率幾乎 100%。傳代時用常規消化液處理 2-3 分鐘,傳代比例 1:5-1:8,連續傳代多次后仍保持核心特性穩定。
培養條件:適宜采用含 10% 胎牛血清的 RPMI-1640 或 DMEM 培養基,添加 1% 抗菌劑,培養環境需控制在 37℃、5% CO?飽和濕度。細胞密度維持在 20%-60%,密度過高會導致黑色素合成減少,且增殖速率下降。對血清質量要求較高,優質血清可促進細胞黑色素合成和增殖,而低質量血清可能導致細胞形態改變。傳代時避免過度消化,凍存液為 10% DMSO+90% 胎牛血清,復蘇后 24 小時貼壁率約 85%,48 小時可wan全恢復增殖活性。
檢測鑒定:經微生物檢測,無支原體、細菌、真菌污染,符合實驗細胞標準。細胞形態觀察可見明顯的黑色素顆粒,酪an酸酶活性測定呈陽性,證實其黑色素合成能力。染色體核型分析顯示為小鼠正常核型,無明顯異常。功能驗證中,小鼠皮下接種后 7-10 天可形成肉眼可見的黑色腫瘤,且隨著時間推移腫瘤體積迅速增大,具有典型的黑色素瘤生長特性。
應用領域:在黑色素瘤轉移機制研究中,該細胞系被廣泛用于探索轉移相關基因的功能,研究發現沉默 MMP-9 基因可使 B16 細胞的肺轉移率下降 60%,證實 MMP-9 在黑色素瘤轉移中的重要作用。在藥物研發方面,常用于評估抗黑色素瘤藥物的療效,如新型 BRAF 抑制劑可顯著抑制 B16 細胞的增殖,IC50 值約為 1μM。在免yi治療研究中,B16 細胞系是驗證免yi治療策略有效性的常用模型,如 PD-1 抗體治療可使荷瘤小鼠的腫瘤體積縮小 50% 以上,延長生存期。此外,該細胞系還可用于研究黑色素合成機制,為美白藥物的研發提供實驗基礎。
與其他黑色素瘤細胞系相比,B16 細胞系的優勢在于其穩定的黑色素合成能力、強侵襲轉移特性及在小鼠體內的高成瘤率,能較好地模擬臨床黑色素瘤的惡性行為。通過對該細胞系的研究,為黑色素瘤的診斷、治療及預防提供了重要的實驗依據,推動了黑色素瘤研究的不斷發展。

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