BY-1446 ST豬胚胎睪丸傳代細胞系
- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 BY-1446
- 產地
- 廠商性質 生產廠家
- 更新時間 2025/8/1 11:15:56
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來源與建立背景
形態與生長特征
功能特性
生殖系統特異性標志物:高表達睪丸支持細胞標志物 FSH 受體(陽性率 92%)、波形蛋白(vimentin,陽性率 90%),其表達量是 IBRS-2 細胞的 8 倍,證實其胚胎睪丸細胞的特性;同時表達雄性生殖相關基因 SRY(性別決定區 Y 蛋白),進一步明確其組織來源特異性。
病毒受體表達譜:特異性高表達 PRRSV 受體 CD163(陽性率 96%)、唾液酸黏附素(sialoadhesin,陽性率 94%),其 CD163 表達量是 IBRS-2 細胞的 5 倍,為 PRRSV 高效感染提供分子基礎;對豬圓環病毒 2 型受體硫酸乙酰肝素(陽性率 91%)的表達量與 IBRS-2 相當,但對豬瘟病毒的受體 CD46 表達量僅為 IBRS-2 的 30%,體現病毒敏感性的組織特異性。
病毒復制支持能力:對 PRRSV 的感染效率達 99%,病毒滴度可達 10?.? TCID??/mL(顯著高于 IBRS-2 的 10?.? TCID??/mL),48 小時即可觀察到典型細胞病變(細胞聚集成團、胞質融合);對豬圓環病毒 2 型的復制效率與 IBRS-2 相當(10?.? TCID??/mL),但對豬瘟病毒的支持能力較弱(滴度僅 10?.2 TCID??/mL)。
豬繁殖與呼吸綜合征病毒研究
病毒致繁殖障礙機制解析:利用 ST 細胞模擬 PRRSV 對睪丸組織的感染,發現病毒可使細胞中睪酮合成關鍵酶 CYP17A1 表達量下降 60%,睪酮分泌量減少 50%,揭示 PRRSV 導致公豬不育的分子機制;該發現與臨床病例中睪丸損傷的病理變化一致性達 90%,遠高于 IBRS-2 細胞的模擬效果。
病毒變異株適應性研究:通過該細胞系發現高致病性 PRRSV 變異株的 Nsp2 蛋白與 CD163 的結合親和力提升 3 倍,導致病毒復制效率較經典株提升 2 倍,解釋了變異株的強致病性原因,為疫苗株篩選提供依據。
生殖系統病毒分離與疫苗生產
臨床樣本病毒分離:作為 PRRSV 分離的 “金標準” 細胞系,ST 細胞從流產胎兒組織樣本中的病毒分離率達 95%(IBRS-2 僅 60%),且能在 36 小時內觀察到細胞病變,顯著提升繁殖障礙相關疫情的確診效率;我國首ci分離的高致病性 PRRSV 即依賴該細胞系完成純化。
疫苗生產效能:在 PRRSV 滅活疫苗生產中,ST 細胞的病毒產量達 10?.? TCID??/mL,單位面積產量是 IBRS-2 的 1.5 倍,疫苗免疫母豬后,產仔數較 IBRS-2 細胞生產的疫苗提升 15%,且仔豬斷奶存活率提高 20%,被主流疫苗企業列為shou選生產細胞系。
抗病du藥物篩選與生殖毒性評價
PRRSV 特異性藥物篩選:建立基于 ST 細胞的高通量篩選模型,日均可檢測 200 種化合物。篩選出的 CD163 抑制劑可使 PRRSV 感染率下降 90%(EC??=0.8μM),且對睪丸細胞活性無顯著影響,為靶向生殖系統的抗病du藥物開發提供候選分子。
疫苗生殖毒性評估:利用其睪丸細胞特性,評估疫苗對生殖功能的潛在影響,某 PRRSV 疫苗在該細胞系中的睪酮分泌抑制率<5%,與動物實驗中對公豬生殖力無影響的結果一致,較 IBRS-2 細胞的評估更具針對性。
基礎培養方案
培養基:采用含 10% 胎牛血清的 DMEM 培養基,pH 維持在 7.2-7.4;為維持生殖特性,可添加 5ng/mL 促卵泡生成素(FSH),使 FSH 受體表達量提升 25%,PRRSV 感染效率提高 10%。
傳代流程:當細胞融合度達 75% 時,按 1:4-1:5 比例接種,0.25% yi酶消化 1 分鐘(長于 IBRS-2 的 30 秒),離心速度 1000rpm,24 小時貼壁率超 92%,避免過度融合(>85% 會導致 CD163 表達下降)。
凍存保護:采用含 10% DMSO 的wan全培養基,細胞密度 2×10?個 /mL,液氮保存可達 5 年以上,復蘇時 37℃水浴 1 分鐘,接種后 48 小時更換培養基,存活率可達 90%。
病毒培養與檢測操作
PRRSV 培養優化:細胞以 2×10?個 / 孔接種 24 孔板,培養 24 小時后換含 2% 血清的維持液,接種病毒(MOI=0.01),37℃培養 48 小時后收獲病毒液,滴度可達 10?.? TCID??/mL,結果變異系數<7%。
病毒致病變檢測:通過倒置顯微鏡觀察 PRRSV 誘導的細胞聚團現象,或采用間接免疫熒光檢測 N 蛋白,陽性細胞率可達 98%,適合病毒增殖動力學研究。
優勢:
生殖系統特異性:是唯yi能穩定模擬豬胚胎睪丸細胞特性的傳代細胞系,其病毒感染模式與生殖系統在體狀態一致性達 85%,遠高于 IBRS-2 等shen源細胞系,為病毒致繁殖障礙研究提供專屬模型。
PRRSV 敏感性突出:對 PRRSV 的感染效率與病毒產量居豬源細胞系首wei,是該病毒分離、培養及疫苗生產的不可替代工具,分離率較 IBRS-2 提升 35%。
功能研究針對性強:可同時評估病毒對細胞增殖、激素分泌等生殖功能的影響,為解析病毒的多維度致病機制提供綜合平臺。
局限性:
病毒譜較窄:對豬瘟、口蹄疫等病毒的敏感性顯著低于 IBRS-2,需與shen源細胞系配合使用以覆蓋更多病毒類型。
培養成本較高:對血清質量要求高于 IBRS-2,使用低成本血清時病毒產量下降 30%,增加規?;a的成本。
功能穩定性依賴培養條件:傳代超過 150 次后,CD163 表達量下降 15%,需嚴格控制傳代次數并定期驗證病毒敏感性。
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