您還在為實(shí)驗(yàn)的問題困擾？或在為超出了實(shí)驗(yàn)費(fèi)用猶豫不決？

輝駿生物為感謝新老客戶對(duì)我們的支持，特別定制了2022年*，pull down實(shí)驗(yàn)

八折*購：

Pull down概念

在Pull down實(shí)驗(yàn)中，帶標(biāo)簽的誘餌蛋白能被特異結(jié)合該標(biāo)簽的固相親和配基捕獲，形成“次級(jí)親和支持物”，用于純化與誘餌蛋白相互作用的其他蛋白。純化產(chǎn)物洗脫后，經(jīng)Western blot驗(yàn)證或LC-MS/MS，即可證明或鑒定與誘餌蛋白互作的蛋白。


Pull down實(shí)驗(yàn)流程

圖1. Pull down流程示意圖

Pull down實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì)

1、構(gòu)建含His或GST標(biāo)簽的誘餌蛋白原核表達(dá)載體；

2、原核表達(dá)誘餌蛋白（我們采用自誘導(dǎo)培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)菌，能有效降低包涵體的形成）；

3、細(xì)菌裂解液過柱，帶標(biāo)簽的誘餌蛋白被固相化親和配基捕獲，產(chǎn)生“次級(jí)親和支持物”；

4、待測(cè)樣品裂解液過柱孵育，與誘餌蛋白互作的蛋白被“次級(jí)親和支持物”吸附；

5、清洗，離心，去除未結(jié)合的雜蛋白；

6、洗脫，得到誘餌蛋白及其互作蛋白的復(fù)合物；

7、如要驗(yàn)證某蛋白X與誘餌蛋白互作，則將6.所得的蛋白復(fù)合物與X蛋白的抗體孵育，做Western blot驗(yàn)證即可；

8、如要尋找誘餌蛋白可能的互作蛋白，則需將6.所得的蛋白復(fù)合物做LC-MS/MS鑒定。

圖2. Pull down實(shí)驗(yàn)流程圖

生物信息學(xué)分析

GO注釋統(tǒng)計(jì)

Pathway分析

Pull down實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)內(nèi)容

1、原核表達(dá)載體構(gòu)建；

2、融合蛋白的誘導(dǎo)表達(dá)與純化；

3、pull down捕獲互作蛋白；

4、Western blot驗(yàn)證或LC-MS/MS鑒定互作蛋白；

5、數(shù)據(jù)檢索、生物信息學(xué)分析；

6、結(jié)果分析與報(bào)告整理。

訂購Pull down技術(shù)服務(wù)須知

為保證pull down實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行，請(qǐng)告知您的研究背景和目的，并提供目的蛋白對(duì)應(yīng)的mRNA序列或?qū)?yīng)基因的NCBI登錄號(hào)，及擬用的融合標(biāo)簽。


活動(dòng)聲明

1、活動(dòng)時(shí)間：2022.08.01—2022.10.31；非活動(dòng)期間項(xiàng)目不享受相關(guān)優(yōu)惠；

2、本活動(dòng)終解釋權(quán)歸廣州輝駿生物科技有限公司所有。