γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(γ-GT)測試盒

微量法 100T/96S 

注意：正式測定之前選擇 2-3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。 

測定意義： 

γ-GT 是γ-谷氨酰循環(huán)中的關(guān)鍵酶，催化 GSH 降解。γ-GT 催化 GSH 或者其他γ-谷氨酰基化合物上的γ-谷氨酰基轉(zhuǎn)移到受體。也可以催化 GSH 和其他γ-谷氨酰基化合物的水解，產(chǎn)生谷氨-酸鹽，在細(xì)胞外谷胱-甘肽新陳代謝中起了重要的作用。 

測定原理： 

γ-GT 催化谷氨酰對(duì)硝基苯胺中γ-谷氨酰基轉(zhuǎn)移給 N-甘氨酰甘氨-酸，生成對(duì)硝基苯胺，在405nm 有特征光吸收；通過測定 405nm 光吸收增加速率，來計(jì)算γ-GT 酶活性。 

自備儀器和用品： 

低溫離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)節(jié)移液器、酶標(biāo)儀、96 孔板、蒸餾水試劑組成和配制：試劑一：液體 100mL×1 瓶，4℃保存。試劑二：液體 25mL×1 瓶，4℃保存。試劑三：粉劑×1 瓶，4℃保存。 

粗酶液提取： 

1. 組織：按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，加入 1mL 試劑一）進(jìn)行冰浴勻漿。8000g，4℃離心 15min，取上清，置冰上待測。

2. 細(xì)菌、真菌：按照細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：試劑一體積（mL）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬細(xì)胞加入 1mL 試劑一），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率 300w，超聲 3 秒，間隔7 秒，總時(shí)間 3min）；然后 8000g，4℃，離心 15min，取上清置于冰上待測。γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(γ-GT)測試盒

3. 血清等液體：直接測定。