谷胱-甘肽還原酶（GR）測試盒

分光光度法 50 管/48 樣 

注意：正式測定之前選擇 2-3 個預期差異大的樣本做預測定。 

測定意義： 

GR 是廣泛存在于真核和原核生物中的一種黃素蛋白氧化還原酶，是谷胱-甘肽氧化還原循環(huán)的關鍵酶之一（通常昆蟲中 GR 被 TrxR 取代）。GR 催化 NADPH 還原 GSSG 生成 GSH，有助于維持體內(nèi) GSH/GSSG 比值。GR 在氧化脅迫反應中對活性氧清除起關鍵作用，此外 GR還參與抗壞血酸－谷胱-甘肽循環(huán)途徑。 

測定原理： 

GR 能催化 NADPH 還原 GSSG 再生 GSH，同時 NADPH 脫氫生成 NADP+；NADPH 在 340 nm 有特征吸收峰，相反 NADP+在該波長無吸收峰；通過測定 340 nm 吸光度下降速率來測定 NADPH 脫氫速率，從而計算 GR 活性。 

自備儀器和用品： 

紫外分光光度計、低溫離心機、水浴鍋、移液器、1mL 石英比色皿和蒸餾水 

試劑組成和配置： 

試劑一：液體 100mL×1 瓶，4℃保存。 

試劑二：粉劑×2 瓶，-20℃保存。臨用前加入 3 mL 蒸餾水，混勻。 

試劑三：粉劑×2 支，-20℃保存。臨用前加入 1.5 mL 蒸餾水，混勻。 

粗酶液提取： 

1. 組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，加入 1mL 試劑一）進行冰浴勻漿。8000g，4℃離心 15min，取上清，置冰上待測。

2. 細菌、真菌：按照細胞數(shù)量（104 個）：提取液體積（mL）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬細胞加入 1mL 試劑一），冰浴超聲波破碎細胞（功率 300w，超聲 3 秒，間隔 7秒，總時間 3min）；然后 8000g，4℃，離心 15min，取上清置于冰上待測。

3. 血清等液體：直接測定谷胱-甘肽還原酶（GR）測試盒