土壤酸性磷酸酶(S-ACP)測試盒

熒光法 100 管/96 樣 

注意：正式測定之前選擇 2-3 個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。 

測定意義： 

 土壤磷酸酶是一類催化土壤有機(jī)磷礦化的酶，其活性的高低直接影響著土壤中有機(jī)磷的分解轉(zhuǎn)化及其生物有效性，是評價土壤磷素生物轉(zhuǎn)化方向與強(qiáng)度的指標(biāo)。土壤磷酸酶受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和 pH 顯著影響，根據(jù)最適 pH 范圍，通常分為酸性、中性和堿性三種類型。 

測定原理： 

4-羥甲基-7-香豆-素(MUB)在 365 nm 波長處激發(fā), 能在 470 nm 處檢測到熒光, 它與某些物質(zhì)結(jié)合后熒光特性消失, 通過酶的水解作用MUB釋放出來, 通過檢測熒光量來表征酶活性。 

自備儀器和用品： 

多功能酶標(biāo)儀、恒溫培養(yǎng)箱、分析天平、可調(diào)式移液器、冰、蒸餾水。 

試劑組成和配制： 

試劑一：液體 120mL×1 瓶，4℃保存。 

試劑二：粉劑×1 瓶，4℃避光保存。用前加 11 mL 蒸餾水充分溶解。 

試劑三：液體 10mL×1 瓶，4℃保存。粗酶液提取：新鮮土樣自然風(fēng)干或 37℃烘箱風(fēng)干，過 30~50 目篩。

按照土壤質(zhì)量（g）：試劑一 mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 土壤，加入 1mL 試劑一），振蕩混勻。 

測定步驟： 

1. 測定管：在震蕩條件下取 100 μL 土壤懸液到 EP 管中，加入 100 μL 試劑二，30℃震蕩避光培養(yǎng) 3 h，從中吸取 134 μL 到黑色不透光 96 孔板中，加入 66 μL 試劑三后用多功能酶標(biāo)儀進(jìn)行檢測，激發(fā)光波長 365 nm，測定波長 470nm。 土壤酸性磷酸酶(S-ACP)測試盒