亚州一区二区三区中文字幕国产精品-日韩人妻一区二区三区蜜桃视频-亚洲中文字幕久久无码精品-午夜精品亚洲一区二区三区嫩草-日韩人妻一区二区三区蜜桃视频-国产一区二区精品高清在线观看-国产欧美日韩综合精品一区二区

產(chǎn)品推薦:氣相|液相|光譜|質(zhì)譜|電化學(xué)|元素分析|水分測定儀|樣品前處理|試驗(yàn)機(jī)|培養(yǎng)箱


化工儀器網(wǎng)>技術(shù)中心>操作使用>正文

歡迎聯(lián)系我

有什么可以幫您? 在線咨詢

抗體保存注意事項(xiàng)

來源:廣州市齊云生物技術(shù)有限公司   2011年06月22日 21:42  

抗體保存得當(dāng)與否,直接決定了抗體的活性和使用效果!如果抗體保存得當(dāng),大部分抗體活性都可以維持?jǐn)?shù)月甚至數(shù)年。本指南以abcam 抗體保存方法為主,同樣也可以應(yīng)用到其他絕大部分公司的抗體產(chǎn)品!
請謹(jǐn)記!無論何時(shí)請按照說明書推薦的保存條件正確保存抗體!

1. 收到抗體后請務(wù)必在12000rpm 離心1-5min 后再打開管蓋進(jìn)行分裝和保存!
質(zhì)優(yōu)的抗體使用非常特殊的儲(chǔ)存管,只有在12000rpm 離心1-5min 才能將附著在管壁或蓋內(nèi)的抗體全部離心下來。即使是在10000rpm 離心也會(huì)導(dǎo)致離心不*,導(dǎo)致出現(xiàn)抗體的量不足的現(xiàn)象!
2.
對于大部分抗體,比較合適的保存方式是分裝后保存在 -20 or -80 度對絕大多數(shù)抗體來說,保存在-20 度是*足夠了。沒有任何證據(jù)顯示保存在-80度 會(huì)有更多的好處!
o
分裝可以zui大程度的降低反復(fù)凍融對抗體活性的損害,同時(shí)也降低了由于多次從同一管中吸取抗體造成的污染可能性。
o
分裝的量以一次實(shí)驗(yàn)用完為好,zui少不能少于10ul 每份。因?yàn)榉盅b體積越小,抗體的濃度越可能會(huì)受到蒸發(fā)以及管壁吸附的影響
o
復(fù)融后的分裝抗體如果一次用不完,將剩余母液保存在4 度,避免再凍起來!
o
抗體工作液應(yīng)該當(dāng)天配制當(dāng)天用完,在4 度 盡量不要超過1 天。
o
避免將抗體保存在自動(dòng)除霜冰箱中。盡量將抗體保存在冰箱里層,而不是門上

3. 大部分抗體收到后4 度短暫保存1-2 周對抗體活性是沒有影響的。
如果抗體很快(1-2 周)會(huì)使用,推薦在4 度保存,這是為了避免反復(fù)凍融對抗體活性的損害。
如果要長期保存則是在-20 or -80 度。zui關(guān)鍵的一點(diǎn)是要根據(jù)說明書推薦的方式來正確的保存抗體!
但是,腹水形式的產(chǎn)品請?jiān)谑盏胶罅⒓磧銎饋恚∫驗(yàn)樵擃惍a(chǎn)品含有大量的蛋白酶,長期在4 度保存會(huì)導(dǎo)致抗體的降解!
4.
大部分抗體的運(yùn)輸條件:一般的運(yùn)輸過程需要1-2 周的時(shí)間,所以是在4 度的條件下來完成的。
4
度運(yùn)輸zui主要的目的是為了避免反復(fù)凍融對抗體活性的損害(如果使用干冰運(yùn)輸,那么收到時(shí)抗體是凍起來的,為了分裝就需要解凍。這就多了一次凍融的過程)。所以運(yùn)輸過程中避免干冰運(yùn)輸!

特殊抗體的保存條件:
1.
酶聯(lián)抗體:永遠(yuǎn)保存在4 度,避免凍起來。否則會(huì)導(dǎo)致酶活性的下降或者喪失
2.
偶聯(lián)抗體:所有偶聯(lián)抗體都是在棕色管中或使用錫箔紙避光保存。尤其是熒光抗體,對光極為敏感,因此在所有的實(shí)驗(yàn)階段也是要避光操作的!
3. IgG3
的同型對照:永遠(yuǎn)保存在4 度,避免凍起來。因?yàn)槿绻霈F(xiàn)凍融過程,該抗體非常容易形成多聚體

無論是保存還是運(yùn)輸,避免反復(fù)凍融!
反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致抗體變性,導(dǎo)致多聚體形成,從而降低抗體的結(jié)合能力!

抗體保存其它相關(guān)信息:
關(guān)于加入甘油保存:有些人會(huì)加50%的甘油到抗體中來避免反復(fù)凍融,甘油在-20 度 會(huì)降低冰點(diǎn)。這對很多抗體可能是可行的。但是abcam 僅對非常小的一部分抗體檢測過其在這種條件下的穩(wěn)定性;而abcam 只對按照推薦條件保存的抗體提供質(zhì)量保證!加入甘油的溶液不建議在-80 度保存,因?yàn)檫@已經(jīng)超過了甘油的冰點(diǎn)。如果您要加入甘油來保存抗體的話,請謹(jǐn)慎注意無菌操作,避免污染!

關(guān)于蛋白保護(hù)劑:
蛋白在高濃度時(shí)更不容易降解(1 mg/ml 或者更高),這就是為什么在抗體中加入BSA 之類作為穩(wěn)定劑的原因了;另一方面,加入的蛋白也可以減少抗體由于管壁吸附所造成的損失。但是如果抗體要用來標(biāo)記的話,則不能加入蛋白穩(wěn)定劑,因?yàn)檫@些穩(wěn)定劑會(huì)和抗體一起競爭結(jié)合標(biāo)記物。

關(guān)于*(sodium azide)的使用:
為了防止微生物污染,*經(jīng)常被加入到抗體中(終濃度0.02% (w/v))。Abcam 的很多抗體已經(jīng)含有了0.02-0.05%的*,在說明書的“Storage buffer”中有標(biāo)明的。

在下述情況中不能使用*:

• 如果抗體用于染色或處理活細(xì)胞,用于體內(nèi)研究:
*在抵抗微生物的同時(shí),對其它大部分有機(jī)物也是有毒的,因?yàn)樗钄嗔司€粒體的cytochrome electron transport system.

• 要偶聯(lián)帶有氨基基團(tuán)的抗體:
*會(huì)干擾任何含有氨基基團(tuán)的偶聯(lián),因此在進(jìn)行偶聯(lián)之前,應(yīng)將*去除。偶聯(lián)后的抗體可以加入*保存,但是濃度只能是0.01%。對于需要偶聯(lián)的抗體,thimerosal(merthiolate)可以替代*作為保護(hù)劑!

注:*的去除方式:
可以通過凝膠電泳或過濾的方式去除!IgG 的分子量是150kDa (IgM ~ 600kDa); *的分子量只有65Da。使用cut off 14kDa 的濾膜即可將*從抗體中去除

 

免責(zé)聲明

  • 凡本網(wǎng)注明“來源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用,并注明“來源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
  • 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對其真實(shí)性負(fù)責(zé),不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí),必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源,并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
  • 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題,請?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。
企業(yè)未開通此功能
詳詢客服 : 0571-87858618
主站蜘蛛池模板: 宿州市| 江油市| 仁化县| 崇文区| 永新县| 景东| 沽源县| 梁河县| 上犹县| 抚松县| 巧家县| 响水县| 平果县| 扶沟县| 临沧市| 绥芬河市| 鲁山县| 普宁市| 富源县| 平舆县| 曲阳县| 特克斯县| 六盘水市| 定边县| 淮南市| 调兵山市| 洱源县| 崇信县| 镇江市| 交口县| 潜江市| 都江堰市| 利津县| 台山市| 准格尔旗| 钦州市| 和林格尔县| 白朗县| 祥云县| 兴仁县| 永宁县|