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BY-0526 Beta-TC-6小鼠胰島素瘤胰島β細胞系

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Beta-TC-6小鼠胰島素瘤胰島β細胞系

Beta-TC-6小鼠胰島素瘤胰島β細胞系源自轉基因小鼠的胰島素瘤組織,是研究胰島 β 細胞功能與糖尿病機制的經典模型。其保留了正常胰島 β 細胞的核心特性,尤其是持續(xù)分泌胰島素的功能,為探索糖代謝調控、胰島細胞增殖分化及糖尿病治療策略提供了穩(wěn)定的實驗載體。

在顯微鏡下,Beta-TC-6 細胞呈貼壁生長,形態(tài)以多邊形和上皮樣為主,細胞排列緊密,部分區(qū)域呈現集落樣生長,宛如胰島組織的微縮結構。細胞直徑約 12-18 微米,胞質豐富,內含大量分泌顆粒 —— 這些顆粒是胰島素合成與儲存的 “倉庫”,通過電鏡可觀察到顆粒內致密的核心結構。胞核圓形或橢圓形,位于細胞中央,核仁清晰,反映出細胞活躍的轉錄與合成功能。該細胞增殖速度中等,倍增時間約 48-72 小時,當融合度達到 70%-80% 時需進行傳代,傳代時用 0.25% 胰dan白酶消化 3-5 分鐘,按 1:3-1:5 比例接種,傳代周期穩(wěn)定,能長期維持分泌胰島素的表型。
培養(yǎng) Beta-TC-6 細胞需精準調控營養(yǎng)環(huán)境。基礎培養(yǎng)基選用高糖 DMEM(葡萄糖濃度 4.5g/L),高糖環(huán)境可模擬生理狀態(tài)下胰島 β 細胞的代謝需求,同時促進胰島素分泌;添加 15% 胎牛血清(FBS)提供生長因子與營養(yǎng)支持,血清中含有的胰島素樣生長因子(IGF)等成分,對維持細胞的分泌功能至關重要。培養(yǎng)箱需維持 37℃、5% CO?的恒定條件,pH 值控制在 7.2-7.4,通過培養(yǎng)基中的酚紅指示劑可直觀監(jiān)測酸堿變化。值得注意的是,該細胞對葡萄糖濃度敏感,低糖環(huán)境可能導致胰島素分泌功能下調,因此換液時需嚴格保證培養(yǎng)基糖濃度的穩(wěn)定性。
在胰島 β 細胞功能研究中,Beta-TC-6 細胞系是解析胰島素分泌調控機制的關鍵工具。正常胰島 β 細胞通過感知血糖濃度變化調節(jié)胰島素釋放,而該細胞系保留了這一核心特性 —— 在高糖刺激下,胰島素分泌量可較基礎狀態(tài)提升 2-3 倍。科研人員通過檢測不同糖濃度、激素(如胰高血糖素樣肽 - 1,GLP-1)或藥物作用下的胰島素水平,可探索 cAMP、鈣離子信號通路在分泌過程中的作用。例如,GLP-1 通過激活 Gs 蛋白促進 cAMP 生成,進而增強 Beta-TC-6 細胞的胰島素分泌,這一過程可通過檢測細胞內 cAMP 濃度與胰島素釋放量的相關性得到驗證,為開發(fā) GLP-1 受體激動劑類降糖藥提供實驗依據。
在糖尿病機制研究中,Beta-TC-6 細胞系可模擬 1 型和 2 型糖尿病的部分病理狀態(tài)。通過構建細胞損傷模型(如用鏈脲佐菌素誘導 DNA 損傷,或用游離脂肪酸誘導脂毒性),能模擬胰島 β 細胞凋亡或功能衰竭的過程,研究疾病中細胞應激(如內質網應激、氧化應激)的分子機制。例如,高濃度游離脂肪酸可激活 Beta-TC-6 細胞的 JNK 信號通路,導致胰島素基因表達下調,這一發(fā)現為理解 2 型糖尿病中脂毒性導致的 β 細胞功能障礙提供了重要線索。
在藥物篩選領域,Beta-TC-6 細胞系是評估降糖藥物療效與安全性的理想模型。對于促胰島素分泌藥物(如磺脲類),可通過檢測藥物對細胞胰島素釋放的刺激作用,結合細胞存活率分析,篩選高效低毒的候選化合物;對于改善胰島素抵抗的藥物,則可將細胞與胰島素抵抗模型細胞共培養(yǎng),觀察藥物是否能恢復胰島素對糖原合成的促進作用。此外,該細胞系還可用于評估藥物對胰島 β 細胞的保護作用,如檢測抗氧化藥物是否能減輕高糖誘導的細胞凋亡,為糖尿病并發(fā)癥的防治提供新靶點。
前沿研究中,Beta-TC-6 細胞的應用持續(xù)拓展。在干細胞分化研究中,其作為成熟胰島 β 細胞的參照標準,可用于驗證干細胞誘導分化為胰島樣細胞的功能成熟度 —— 通過比較兩者在糖刺激下的胰島素分泌曲線,判斷分化細胞的生理功能接近程度。在類器官構建中,將 Beta-TC-6 細胞與胰島 α 細胞、內皮細胞共培養(yǎng),可形成具有三維結構的 “人工胰島” 模型,更真實地模擬體內胰島的細胞間相互作用,用于研究細胞間信號傳遞(如 α 細胞分泌的胰高血糖素對 β 細胞的調節(jié))對整體代謝的影響。
此外,該細胞系在基因編輯研究中也具有du特jia值。通過 CRISPR 技術敲除或過表達特定基因(如 PDX-1、MafA 等胰島發(fā)育關鍵轉錄因子),可探索其對細胞增殖、胰島素合成及分泌功能的影響,為理解胰島 β 細胞的命運決定機制提供直接證據。這種基因層面的操控,進一步拓展了其在糖尿病分子機制研究中的應用深度。

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