BY-0209 NCI-H596人肺腺鱗癌細胞系
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- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 ATCC
- 型號 BY-0209
- 產地
- 廠商性質 生產廠家
- 更新時間 2025/7/17 16:27:49
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NCI-H596人肺腺鱗癌細胞系
NCI-H596人肺腺鱗癌細胞系是研究肺腺鱗癌這一特殊亞型的標gan模型，以腺鱗雙表型共存、KRAS 驅動及強侵襲特性為顯著特征，在肺腺鱗癌的亞型轉化機制、異質性研究及多靶點藥物研發中具有不可替代的價值，為解析這種兼具腺癌與鱗癌生物學行為的復雜腫瘤提供了精準實驗載體。
來源與背景：該細胞系于 1981 年從 56 歲男性肺腺鱗癌患者的胸腔積液中分離建立，是目前國際上應用zui廣泛的肺腺鱗癌研究模型。肺腺鱗癌作為一種少見的肺癌亞型（占比 2%-5%），因同時包含腺癌和鱗癌兩種成分，臨床治療響應差、預后較單純腺癌或鱗癌更差，5 年生存率僅為 15%-20%。與單純肺腺癌（如 A549）或鱗癌細胞系（如 SK-MES-1）相比，NCI-H596 的du特jia值在于其保留了兩種亞型的混合特征，尤其適合研究腫瘤異質性及亞型間的轉化規律。其明確的胸腔積液來源和長期傳代穩定性，使其既能模擬原發灶的腺鱗混合特性，又能反映晚期腫瘤的侵襲轉移潛能，至今仍是肺腺鱗癌基礎研究與臨床轉化的核心工具。
細胞特性：形態上呈現典型的腺鱗混合特征，貼壁生長的細胞群體中，約 60% 呈多邊形腺上皮樣（含黏液空泡），40% 呈梭形鱗狀上皮樣（含角質顆粒），兩種形態細胞交織排列，無明顯界限。細胞核普遍大而畸形，核仁顯著，核質比 1:1.3，部分細胞可見多核現象，體現高度惡性腫瘤的形態學特征。核心特性包括：雙標志物共表達，免疫熒光顯示 70% 細胞同時表達腺癌標志物 CK7、TTF-1 和鱗癌標志物 CK5/6、p63，其中 TTF-1 與 p63 的共定位率達 55%，wan美復現臨床肺腺鱗癌的表型異質性；KRAS 驅動的增殖，攜帶 KRAS G12C 熱點突變，導致 MAPK 通路持續激活，EGF 刺激可使磷酸化 ERK 水平升高 2.3 倍，細胞增殖速率提升 20%，與 30% 臨床病例的驅動突變特征一致；強侵襲轉移能力，Transwell 實驗中穿膜細胞數是 A549 的 1.8 倍，裸鼠尾靜脈注射后 6 周肺轉移率達 65%，高于多數單純肺腺癌細胞系。傳代時需消化 3-5 分鐘（因貼壁較牢），傳代比例 1:2-1:4，連續傳代 50 次后，鱗癌標志物表達量可能下降 10%-15%，但雙表型特征仍穩定保留。
培養條件：最適培養基為含 10% 胎牛血清的 RPMI-1640（添加 1% 青mei素 - 鏈mei素），培養環境需嚴格控制在 37℃、5% CO?飽和濕度。細胞密度需維持在 20%-70%，當密度超過 80% 時，鱗癌樣細胞比例會從 40% 升至 55%-60%，伴隨 p63 表達上調，提示細胞密度是維持腺鱗比例平衡的關鍵因素。對血清質量敏感，采用低批次胎牛血清時，細胞凋亡率會從 5% 升至 15%-20%，且 CK7 表達量下降 25%。傳代時避免強力吹打，凍存液為 10% DMSO+90% 胎牛血清，復蘇后 24 小時貼壁率 90%，48 小時wan全恢復雙表型生長特性。
檢測鑒定：微生物檢測證實無支原體、細菌及真菌污染，符合 CLSI 實驗細胞標準。基因測序明確 KRAS G12C 突變，EGFR、ALK 等驅動基因野生型，與臨床肺腺鱗癌的基因突變譜高度吻合。染色體核型分析顯示亞三倍體核型（眾數 64-66），存在 12q13-15 擴增（涉及 MDM2 基因）和 17p13 缺失（涉及 p53 基因），這些異常在 40% 的肺腺鱗癌患者中可檢測到。功能驗證顯示，該細胞系的集落形成能力受 KRAS 抑制劑調控，0.5μM sotorasib 可使克隆形成率從 45% 降至 18%，證實其 KRAS 依賴特性。
應用領域：在異質性機制研究中，通過單細胞測序結合該細胞系發現，Notch 通路激活可使腺上皮樣細胞向鱗癌樣細胞轉化，轉化效率達 30%，其中 Hes1 是關鍵調控因子，為 “Notch-Hes1-p63” 轉化軸提供了直接證據。在藥物研發中，其對單純 EGFR 抑制劑（如吉非ti尼）的敏感性較低（IC50=12μM），但與 KRAS 抑制劑聯用后 IC50 降至 2.1μM，協同指數 0.42，推動了 “KRAS 抑制劑 + 抗血管生成藥物” 聯合方案的臨床探索。在微環境研究中，低氧（1% O?）培養 72 小時可使鱗癌標志物表達上調 40%，同時 VEGF 分泌增加 1.5 倍，證實缺氧微環境通過 HIF-1α 促進腺鱗轉化及血管生成，為靶向腫瘤微環境提供了實驗依據。
與其他肺癌細胞系相比，NCI-H596 的核心優勢在于其真實模擬了肺腺鱗癌的 “腺 - 鱗” 混合特性及基因驅動特征，尤其適合解析腫瘤異質性的形成機制。通過該細胞系的研究，已闡明 12 個調控腺鱗轉化的關鍵基因，為開發針對這種復雜亞型的精準治療策略提供了扎實的實驗基礎，持續推動肺腺鱗癌診療水平的提升。
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