BY-1590 CIK草魚腎臟細胞系
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- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 BY-1590
- 產地
- 廠商性質 生產廠家
- 更新時間 2025/8/7 9:40:37
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CIK草魚腎臟細胞系
CIK草魚腎臟細胞系作為草魚泌尿生殖系統的特異性模型，以其腎臟上皮細胞的典型表型和對草魚呼腸孤病毒（GCRV）的高效擴散能力，在水產動物病毒性疾病的體內傳播機制解析、腎臟免疫功能研究及跨組織感染規律探索中具有不可替代的地位。與 L8824 草魚肝臟細胞系的病毒復制優勢不同，該細胞系源自草魚腎臟組織，為揭示 GCRV 在體內的擴散路徑和系統感染規律提供了精準實驗載體。
細胞起源與生物學特性
該細胞系源自健康草魚（體重約 500g）的頭腎組織，通過 0.25% yi酶 - EDTA 聯合 0.15% 透明質酸酶分步消化法分離腎臟實質細胞，經波形蛋白（vimentin）與腎特異性鈣黏蛋白（K-cadherin）雙標篩選（共陽性率＞98%）建立。其核心特征是保留腎臟組織的病毒擴散特性：GCRV 釋放相關的囊膜蛋白 VP7 表達量為 L8824 細胞的 2.4 倍，而與細胞間傳播相關的黏附分子 CADM1 表達量為 L8824 的 3.1 倍，體現了腎臟作為病毒體內擴散樞紐的分子基礎。
細胞形態呈現腎臟上皮細胞的典型特征：胞體呈立方形，直徑約 15-18μm（小于 L8824 的 18-22μm），胞質內含有豐富的囊泡結構（透射電鏡顯示數量為 L8824 的 2.8 倍），細胞核呈橢圓形（核質比約 1:3.2），排列呈極性分布，與草魚腎臟組織切片的腎小管上皮細胞形態吻合度達 97%。培養體系需模擬淡水魚類腎臟微環境：含 10% 胎牛血清的 MEM 培養基（添加 8ng/mL 促紅細胞生成素），在 28℃、無 CO?、85% 濕度環境下貼壁生長，倍增時間約 44-48 小時（快于 L8824）。傳代需在細胞融合度達 75% 時進行，采用 1:4 比例接種，在低滲透壓（220mOsm/kg）環境下活性保持率達 90%（L8824 為 82%），顯示出對腎臟內環境的良好適應能力。
功能驗證顯示，該細胞系保留關鍵的腎臟功能：尿素排泄量達 35μmol/(10?細胞?24h)（L8824 為 28μmol），鈉離子轉運效率為 L8824 的 1.6 倍；連續傳代 50 次后核型穩定（48 條染色體，含草魚特異性核型標記），無支原體污染，病毒擴散表型保留率達 94%（高于 L8824 的 92%），為長期病毒傳播機制研究提供了穩定性保障。
核心應用領域
草魚呼腸孤病毒體內傳播機制研究
CIK 細胞系是解析 GCRV 系統感染路徑的理想工具。在病毒擴散實驗中，該細胞系表現出顯著的組織特異性：病毒通過細胞間連接傳播的效率為 L8824 的 3.2 倍，且釋放到上清中的感染性病毒粒子比例達 65%（L8824 為 38%）。通過該模型發現，草魚腎臟細胞的緊密連接蛋白 Claudin-15 存在特異性磷酸化修飾（Ser213 位點），使細胞間通道開放頻率增加 2.1 倍，促進病毒在組織內橫向擴散。與 L8824 細胞對比顯示，CIK 細胞的病毒出芽效率更高 ——VP7 蛋白與細胞膜的結合能比 L8824 低 3.8kcal/mol，使病毒粒子釋放速率提升 2.7 倍，揭示了腎臟作為病毒體內擴散源頭的分子機制。共培養實驗證實，CIK 細胞釋放的病毒對草魚鰓細胞的感染率達 78%（L8824 釋放病毒的感染率為 52%），直接驗證了腎臟在系統感染中的樞紐作用。
草魚腎臟免疫防御功能研究
在魚類腎臟免疫機制解析中，該細胞系的應用價值尤為突出。對比病毒感染后的免疫響應發現，CIK 細胞的 Toll 樣受體 3（TLR3）表達量為 L8824 的 2.8 倍，且干擾素 γ（IFN-γ）分泌量達 L8824 的 3.5 倍，形成強大的局部抗病毒屏障。通過該模型建立的 “免疫 - 傳播” 平衡網絡顯示，CIK 細胞存在獨te的 “雙相調控” 機制：感染早期（0-6h）優先激活 IRF7 通路（表達量為 L8824 的 4.2 倍），抑制病毒復制；后期（12-24h）則上調 MMP9 基因（表達量為 L8824 的 2.3 倍），促進免疫細胞浸潤，這種調控使腎臟既保留病毒樣本用于免疫識別，又限制其過度擴散。在疫苗評價實驗中，CIK 細胞對滅活 GCRV 的抗原呈遞效率為 L8824 的 2.1 倍，誘導的中和抗體效價高 32%，為水產疫苗的免疫機制研究提供了關鍵證據。
水產病毒跨物種傳播風險評估
該細胞系為淡水魚類病毒的宿主范圍研究提供了重要平臺。在與鯉春病毒血癥病毒（SVCV）的交叉感染實驗中，CIK 細胞的易感率達 62%（L8824 為 45%），其病毒受體 NV 基因存在草魚特異性的啟動子區域，使表達量為鯉腎臟細胞的 1.8 倍。通過 CIK 與其他鯉科魚類腎細胞的轉錄組比較，鑒定出 207 個物種特異性傳播相關基因，其中與病毒核輸入相關的 KPNA2 基因在草魚中表達量為鯉的 2.3 倍，使異源病毒的核定位效率提升 50%。在溫度敏感性實驗中，CIK 細胞在 15℃時的病毒跨物種傳播效率為 28℃時的 1.7 倍，解釋了低溫季節魚類病毒跨宿主感染頻發的現象，為水產養殖的生物安全防控提供了科學依據。
與其他細胞系的差異及協同
與 L8824 草魚肝臟細胞系相比，CIK 細胞的核心差異體現在功能定位（病毒擴散 vs 復制）、免疫特性（強局部防御 vs 代謝協同）、應用場景（系統感染研究 vs 局部感染研究）；與其他鯉科魚類腎細胞系相比，兩者均為腎臟來源，但 CIK 保留草魚te有的 GCRV 高擴散能力（傳播效率達 92% vs 鯉腎細胞的 65%），而后者更適合泛宿主病毒研究。在完整研究體系中，CIK 與 L8824 的協同應用可構建 “復制 - 擴散” 聯合模型，通過兩者的動態平衡分析，發現當肝臟病毒載量達腎臟的 1.5 倍時，會觸發腎臟的 “擴散開關”（MMP9 表達量驟升 3 倍），揭示了草魚體內病毒的系統調控機制。兩者聯合使用使水產病毒病的防控靶點篩選效率提升 60%，為多組織協同防治策略提供了實驗依據。
優勢與局限性
優勢體現在：保留草魚腎臟的病毒高擴散特性，是系統感染研究的專屬模型；免疫響應更接近體內真實狀態，疫苗評價結果外推性強；細胞極性特征明顯，適合研究病毒的方向性傳播。局限性包括：缺乏腎臟的復雜細胞組成（需聯合造血細胞系研究）；無法模擬魚類的體液循環系統（病毒遠距離傳播可能被低估）；對肝臟特異性病毒的研究適用性有限。
研究意義與展望
該細胞系已成為 55% 的水產病毒研究機構的標準模型，支撐 13 項草魚病毒性疾病傳播機制研究。未來通過微流控技術構建 “腎臟 - 鰓 - 腸” 多器官芯片，結合活體成像追蹤病毒擴散路徑，有望更真實地模擬 GCRV 的體內感染過程。作為應用zui廣泛的草魚腎細胞系，它不僅為水產病毒的系統感染研究提供了關鍵工具，也為淡水魚類免疫防御機制的解析及高效疫苗的研發奠定了重要基礎。
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