BY-0983 HB MY-904小鼠雜交瘤細胞系
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- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 BY-0983
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2025/7/21 15:15:12
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HB MY-904小鼠雜交瘤細胞系
HB MY-904小鼠雜交瘤細胞系是單克隆抗體研發(fā)與免疫檢測領域的重要工具,以穩(wěn)定分泌特異性抗體、高效的抗原識別能力及良好的體外培養(yǎng)性能為核心優(yōu)勢,在病原體檢測、腫瘤標志物分析及診斷試劑開發(fā)中應用廣泛,為單克隆抗體的產(chǎn)業(yè)化應用提供了可靠實驗載體。
來源與背景:該細胞系源自 BALB/c 小鼠脾臟 B 淋巴細胞與骨髓瘤細胞的融合產(chǎn)物,通過雜交瘤技術(shù)篩選獲得。雜交瘤技術(shù)通過將具有抗原特異性的 B 淋巴細胞與永生化骨髓瘤細胞融合,得到既能無限增殖又能持續(xù)分泌特異性抗體的細胞系。HB MY-904 細胞系便是這一技術(shù)的成果,其分泌的單克隆抗體可精準識別特定靶抗原,彌補了多克隆抗體特異性不足的缺陷。自建立以來,憑借穩(wěn)定性能,成為免疫檢測領域標準化抗體生產(chǎn)的重要細胞系,為各類免疫分析方法建立提供關鍵試劑支持。
細胞特性:形態(tài)上呈典型雜交瘤細胞形態(tài),貼壁生長時呈上皮樣,細胞輪廓清晰,細胞質(zhì)飽滿,細胞核大而圓,核質(zhì)比約 1:1.9,約 12% 的細胞可見雙核結(jié)構(gòu),體現(xiàn)雜交瘤細胞融合特征。核心特性顯著:抗體分泌穩(wěn)定高效,可持續(xù)分泌針對特定抗原的單克隆抗體,分泌量達 15-20μg/10?細胞 / 24h,連續(xù)傳代 60 次后,抗體分泌能力僅下降 6% 左右;抗原結(jié)合特異性強,與靶抗原的結(jié)合常數(shù)(Kd)達 10??M 級別,與其他同源抗原的交叉反應率低于 0.6%,確保檢測結(jié)果高特異性;增殖性能良好,體外培養(yǎng)倍增時間約 48-54 小時,克隆形成率 42%,接種到 BALB/c 小鼠腹腔后,12-18 天可形成大量腹水,腹水中抗體濃度高達 5-9mg/ml,便于大量制備抗體。傳代時采用常規(guī)方法處理,傳代比例 1:3-1:4,當細胞密度達到 70%-80% 時需及時傳代,過度密集會導致抗體分泌量下降 16%-20%。
培養(yǎng)條件:適宜采用含 10% 胎牛血清的 RPMI-1640 培養(yǎng)基,添加 1% 雙抗,培養(yǎng)環(huán)境控制在 37℃、5% CO?飽和濕度。關鍵培養(yǎng)要點:血清質(zhì)量把控嚴格,需選用低內(nèi)毒素優(yōu)質(zhì)胎牛血清,劣質(zhì)血清會使細胞活力降低 30%,抗體分泌量減少 38%;無血清培養(yǎng)適配性,在無血清培養(yǎng)基中添加適量生長因子,可維持細胞正常生長,且抗體純度提高至 95% 以上,減少后續(xù)純化步驟;腹水制備規(guī)范,小鼠腹腔注射前 7 天預先注射降植烷,每只小鼠接種 1.2×10?個細胞,16-20 天收集腹水,每只可收獲 5-9ml,腹水經(jīng)純化后抗體活性保持穩(wěn)定。凍存采用含 10% DMSO 的胎牛血清凍存液,程序降溫后液氮保存,復蘇后 48 小時貼壁率達 85%,抗體分泌功能恢復 90% 以上。
檢測鑒定:經(jīng)微生物檢測,無細菌、真菌、支原體污染,符合雜交瘤細胞質(zhì)量標準。抗體亞型鑒定顯示為 IgG1 型,輕鏈為 κ 型;通過 ELISA、免疫熒光等方法驗證,其分泌的抗體能與靶抗原特異性結(jié)合,且在不同檢測體系中均保持良好反應性。染色體核型分析顯示染色體數(shù)目 86-96 條,融合親本 B 淋巴細胞與骨髓瘤細胞的染色體特征,符合雜交瘤細胞遺傳學特性。功能驗證中,該抗體用于 Western blot 檢測時,能特異性識別靶抗原條帶,無雜帶干擾,證實其在分子檢測中的可靠性。
應用領域:在病原體檢測方面,利用該細胞系分泌的抗體建立的免疫層析試紙條,對靶病原體的檢測靈敏度達 0.4ng/ml,檢測時間僅需 10 分鐘,適用于現(xiàn)場快速檢測;在腫瘤標志物分析中,基于其抗體開發(fā)的化學發(fā)光檢測試劑盒,可對血清中的腫瘤標志物進行定量分析,線性范圍寬,檢測準確率達 93% 以上。在抗體工程研究中,可作為模板進行抗體人源化改造,降低異源抗體的免疫原性,為治療性抗體研發(fā)提供基礎。此外,該細胞系可用于評估不同培養(yǎng)體系對抗體生產(chǎn)的影響,通過優(yōu)化懸浮培養(yǎng)參數(shù),能使抗體產(chǎn)量提升 1.6-2.3 倍,有利于降低大規(guī)模生產(chǎn)的成本。
與其他雜交瘤細胞系相比,HB MY-904 細胞系的優(yōu)勢在于抗體分泌穩(wěn)定性更強、傳代次數(shù)上限更高,且抗體的抗原結(jié)合活性受培養(yǎng)條件波動影響較小,在標準化抗體生產(chǎn)中表現(xiàn)突出。通過該細胞系的應用,已開發(fā)出多種免疫檢測試劑盒,廣泛應用于臨床診斷和科研實驗,為免疫檢測技術(shù)發(fā)展及相關疾病診斷提供重要支持。
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