系列硫氧還蛋白過氧化物酶(TPX)測試盒
參考價 | ¥ 250 |
訂貨量 | ≥1盒 |
- 公司名稱 上海優選生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號
- 產地
- 廠商性質 生產廠家
- 更新時間 2019/12/20 13:19:55
- 訪問次數 212
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供貨周期 | 現貨 | 規格 | 50管/24樣;100管/48樣 |
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貨號 | YX-C-A203 | 應用領域 | 生物產業 |
主要用途 | 科學研究 |
測定原理:
TPX 催化H2O2氧化二硫蘇糖醇(DTT),H2O2的吸收波長為240nm,通過測定240nm吸光度的下降速率,通過對照減去過氧化氫酶(CAT)催化分解的H2O2,即可計算出TPX活性。因此,本試劑盒可以同時測定樣品TPX和CAT活性。
自備儀器和用品:
低溫離心機、水浴鍋、可調節移液器、紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板(UV板)、和蒸餾水
試劑組成和配制:
試劑一:液體×1 瓶,室溫保存。
試劑二:液體×1 瓶,-20℃保存。
試劑三:液體×1 支,4℃。
粗酶液提取:
1. 組織:按照組織質量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,
加入1mL試劑一)進行冰浴勻漿。8000g,4℃離心10min,取上清置冰上待測。
2. 細菌、真菌:按照細胞數量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min); 然后 8000g,4℃,離心10min,取上清置于冰上待測。
3. 血清等液體:直接測定。
TPX 測定操作:
1. 分光光度/酶標儀計預熱30min,調節波長到240nm,蒸餾水調零。
2. 試劑一和試劑二置于25℃(一般物種)或者37℃(哺乳動物)水浴預熱30min。
3. CAT活性測定管:取微量石英比色皿或96孔板,加入4μL上清液,180μL試劑一,16μL試劑三,迅速混勻后于240nm 測定10s和130s吸光度,記為A1和A2。
4. 總活性測定管:取取微量石英比色皿或96孔板,加入4μL上清液,180μL試劑二,16μ試劑三,迅速混勻后于240nm 測定10s和130s吸光度,記為A3和A4。
注意:每個樣品都需要做對照管,以減去過氧化氫酶(CAT )催化降解的H2O2。