TKB-1人肺癌細(xì)胞系
TKB-1人肺癌細(xì)胞系源于人體肺癌組織,是研究肺癌發(fā)生發(fā)展機(jī)制、評(píng)估抗癌治療策略的重要細(xì)胞模型。在顯微鏡下,TKB-1 細(xì)胞多呈不規(guī)則多邊形或梭形,以貼壁方式緊密生長(zhǎng)于培養(yǎng)瓶底部,細(xì)胞間連接緊密,常堆疊形成多層細(xì)胞集落。細(xì)胞胞質(zhì)豐富,經(jīng)染色后呈嗜酸性,內(nèi)部線粒體數(shù)量顯著增多且形態(tài)異常,為癌細(xì)胞的快速增殖提供充足能量;內(nèi)質(zhì)網(wǎng)與高爾基體高度發(fā)達(dá),參與合成大量促癌蛋白。細(xì)胞核大且畸形,核質(zhì)比例嚴(yán)重失調(diào),核仁明顯且數(shù)目增多,異常核分裂象頻繁出現(xiàn),充分彰顯其惡性腫瘤細(xì)胞特性。
TKB-1 細(xì)胞的生物學(xué)特性鮮明且復(fù)雜。在增殖方面,其細(xì)胞周期調(diào)控嚴(yán)重紊亂,Cyclin D1、CDK4 等細(xì)胞周期蛋白高表達(dá),促使細(xì)胞周期從 G1 期快速進(jìn)入 S 期,在適宜培養(yǎng)條件下,細(xì)胞倍增時(shí)間約為 30 - 36 小時(shí)。細(xì)胞內(nèi)的 EGFR - MAPK、PI3K/AKT 等信號(hào)通路異常激活,EGFR 基因若發(fā)生敏感突變,可導(dǎo)致其持續(xù)激活,通過 RAS - RAF - MEK - ERK 級(jí)聯(lián)反應(yīng),激活下游轉(zhuǎn)錄因子,促進(jìn)細(xì)胞增殖;PI3K/AKT 通路則抑制細(xì)胞凋亡,增強(qiáng)細(xì)胞代謝活性,進(jìn)一步維持癌細(xì)胞的存活與增殖。在侵襲轉(zhuǎn)移能力上,TKB-1 細(xì)胞分泌基質(zhì)金屬蛋白酶 MMP-2 和 MMP-9 的水平顯著高于正常細(xì)胞,這些蛋白酶能夠高效降解細(xì)胞外基質(zhì)中的膠原蛋白、層粘連蛋白等成分,破壞基底膜完整性;同時(shí),細(xì)胞表面整合素家族蛋白和上皮 - 間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)相關(guān)蛋白表達(dá)上調(diào),增強(qiáng)細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)的黏附、脫離能力,以及細(xì)胞的遷移能力,為癌細(xì)胞突破上皮屏障、發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移創(chuàng)造條件。此外,TKB-1 細(xì)胞對(duì)部分傳統(tǒng)hua療藥物存在天然耐藥性,這種特性為研究肺癌耐藥機(jī)制提供了良好的實(shí)驗(yàn)材料。
培養(yǎng) TKB-1 人肺癌細(xì)胞系需嚴(yán)格把控各個(gè)環(huán)節(jié)。基礎(chǔ)培養(yǎng)基通常選用含 10% 優(yōu)質(zhì)胎牛血清的 DMEM 培養(yǎng)基,胎牛血清中豐富的生長(zhǎng)因子、激素和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),能滿足細(xì)胞生長(zhǎng)和代謝的需求;添加 1% 的青mei素 - 鏈mei素雙抗溶液,防止細(xì)菌污染。將細(xì)胞置于 37℃、5% 二氧化碳的恒溫培養(yǎng)箱中,模擬人體生理環(huán)境,維持細(xì)胞內(nèi)的酸堿平衡和酶活性。當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到 80% - 90% 時(shí),使用 0.25% 胰dan白酶 - EDTA 溶液進(jìn)行消化傳代,消化過程需在顯微鏡下實(shí)時(shí)觀察,避免過度消化損傷細(xì)胞,傳代比例一般控制在 1:3 - 1:5 。凍存時(shí),采用 90% 胎牛血清與 10% 二甲基亞砜混合凍存液,遵循程序降溫原則,先于 - 80℃冰箱過夜,再轉(zhuǎn)移至液氮中長(zhǎng)期保存。在培養(yǎng)過程中,需定期檢測(cè)細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)、基因表達(dá)情況以及耐藥相關(guān)蛋白水平,確保細(xì)胞特性穩(wěn)定,為實(shí)驗(yàn)提供可靠的細(xì)胞模型。
在科研應(yīng)用領(lǐng)域,TKB-1 細(xì)胞系發(fā)揮著關(guān)鍵作用。在肺癌發(fā)病機(jī)制研究中,科研人員借助該細(xì)胞系深入探究 EGFR、KRAS 等基因突變與肺癌發(fā)生發(fā)展的關(guān)聯(lián),發(fā)現(xiàn)特定基因突變可通過激活相關(guān)信號(hào)通路,驅(qū)動(dòng)正常肺細(xì)胞向癌細(xì)胞轉(zhuǎn)化。在藥物研發(fā)方面,TKB-1 細(xì)胞是篩選抗肺癌藥物的重要模型,無論是針對(duì) EGFR 突變的靶向藥物吉非ti尼、奧希替尼,還是新型免疫檢查點(diǎn)抑制劑,都需在該細(xì)胞系上進(jìn)行初步的藥效評(píng)估;針對(duì)其耐藥特性開展的聯(lián)合用藥研究,也取得了顯著進(jìn)展,為克服肺癌耐藥難題提供了新方向。此外,TKB-1 細(xì)胞還用于評(píng)估肺癌的新型治療方案,如納米顆粒載藥系統(tǒng)、基因治療策略等,助力優(yōu)化肺癌治療手段,推動(dòng)肺癌診療技術(shù)不斷進(jìn)步。
以上信息僅供參考,詳細(xì)信息請(qǐng)聯(lián)系我們。